九香虫粗提物对SGC-7901和HepG2细胞增殖及细胞周期的影响.pdf

时珍国医国药2013年第24卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2013VOL．24NO．1 九香虫粗提物对 SGC一7901和 HepG2 细胞增殖及细胞周期的影响 侯晓晖，孙 廷 ，李晓飞 (遵义医学院，贵州 遵义 563000) 摘要 ：目的 研究九香虫粗提物对人胃癌SGC一7901细胞和肝癌HepG2细胞体外增殖和细胞周期的影响。方法 以乙醇 为溶剂采用冷浸法获得九香虫的粗提物；利用倒置显微镜观察给药后两种癌细胞的形态变化；MTT法分析粗提物对两种 癌细胞体外增殖的抑制作用；流式细胞仪分析粗提物对两种癌细胞周期的影响。结果 九香虫粗提物对 SGC一7901和 HepG2细胞生长有抑制作用，并呈明显的剂量依赖性；九香虫粗提物作用24h后，对SGC一7901和HepG2细胞的半数抑 制浓度 (IC )分别为 1281．621xg,／ml和 582 ml；流式细胞仪分析结果显示，与对照组细胞相 比，HepG2细胞在细胞周 期的分布上呈现显著的变化 ，即S期和G ／M期细胞比例明显降低、G ／G 期细胞比例明显升高。结论 乙醇粗提物能抑 制两种肿瘤细胞的体外增殖，对HepG2细胞抗肿瘤活性可能是由于通过其细胞周期的阻滞引起。 关键词：九香虫；粗提物；SGC一7901；HepG2；MTT法； 细胞增殖； 细胞周期 DOI标识 ：doi：10．3969／．i．issn．1008-0805．2013．01．046 中图分类号 ：R962 文献标识码： 文章编号 ：1008-0805(2013)01-0108-02 九香虫AspongopuschinensisDallas，又称打屁虫 、屁巴虫，隶属 物浸膏0．5g，溶于0．5ml的无水乙醇中，充分溶解后过滤除菌， 于半翅 目(Hemiptera)、蝽科 (Pentatomidae)，我国安徽 、江苏、浙 一 20℃保存备用。 江、江西、福建、台湾、广东、广西 、湖南、云南、贵州、四川等省均有 2．2 细胞培养 将SGC一7901和HepG2细胞置于37℃、饱和湿 分布，为我国特有种…，是一种药食兼可的重要昆虫。作为药 度5％CO：培养箱中常规培养，使用含 10％胎牛血清及 1％抗生 物，用于中医临床 ，在治疗肝 胃气滞所致的胸胁胀痛、肾阳不足之 素 (青霉素 100mg／L和链霉素 100mg／L)的RPMI1640培养 阳痿早泄等症以及癌症疼痛等方面具有独特的疗效，常配伍应 基。细胞呈单层生长并铺满瓶底时，采用0．25％的胰酶?肖化传 用 ；作为食物 ，民间一直流传着 “有钱吃鹿茸，没钱吃屁巴虫” 代 ，取对数生长期的细胞用于实验。 的俗语 ，其味酥脆可 口，香气四溢，可使人精神健旺，容光焕发。 2．3 细胞生长抑制实验 取对数生长期的细胞，调整细胞浓度至 现代医学证实了九香虫的药理作用，即具有抗菌、抗癌、抗炎、解 1 X 10。／ml， 将其接种于96孔板中待用。实验设置调零组、空 白 痉及镇痛和恢复机体免疫功能等作用 。。。目前，通过各种检测 组和阴性对照组 ，每孔加入 1001xl各浓度药物。药物浓度为 526 手段已证实，九香虫含有九香虫油，包含硬脂酸 、棕榈酸、油酸 、多 ～ 4000 ml6个不同浓度，并设 6个重复。将细胞置于CO 种蛋白质 、甲壳质等复杂成分 ，是人体所需的重要营养成分 。 培养箱中培养24h后，加入MTr溶液201xl，继续培养4h后 ，弃去 由此可见 ，九香虫无论是在中药领域还是保健食品中，都具有广 上清液 ，加入 DMSO 150 l，振荡 10min。酶标仪检测吸光度 阔的开发前景和应用价值。 (OD)值，并用下式计算肿瘤细胞生长抑制率及其 Ic，。 ，实验重 迄今为止，国内学者对九香虫的研究多集中在其临床配伍等 复3次： 方面，而对其药用原理的研究少之又少。虽然资料记载九香虫对 肿瘤细胞生长抑制率 (％)= [1一D (K)给药组／D (K)对 食管癌 、胃癌等有一定疗效 ，但缺乏药理实验数据的支持。本 照组] ×100％ 研究通过冷浸法提取九香虫体内的有效成分进行体外抗 胃癌和 IC。=