利用重叠延伸PCR定点突变衰退病P23基因.PDFVIP

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2017-03-13 发布于湖北
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利用重叠延伸PCR定点突变衰退病P23基因.PDF

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利用重叠延伸PCR定点突变衰退病P23基因

第31 卷第12 期西南大学学报 ( 自然科学版) 2009年12月 V ol1 31 N o1 12 J ournal of Southw est U niv ersity ( N at ural Science Edit ion) Dec1 2009 167 3- 9 86 8( 2009) 12 - 0043- 05 PCR P23 1 1, 2 2, 3 1, 2 1, 2 4 阳佳位 , 王淼 , 程春振 , 魏召新 , 陈凤娟 11 , 4007 16 ; 21 , 4007 12 ; 31 , 4007 16 ; 41 , 40 8003 分析已柑桔衰退病强毒系基因组并克隆CT V 中一个重要的基因P2 3. 利用重叠延伸PCR 法的原理, 成功的将 P23 基因保守序列第20 6 位碱基由C 突变成T , 由此该位点成为限制性酶( SacI) 的识别位点. 把改良后的 P23 基因插入到T 载体中, 测序发现成功地突变掉目的位点. 为进一步利用分子生物学手段研究CT V 病毒, 克隆突变 CT V 序列奠定了基础. 定点突变; 重叠延伸 PCR; 柑桔; CT V 病毒 : S666; Q785 : A . [ 1] . RN A , ( cl oster ov ir i dae ) [ 2] ( clost erov ir us) . , , . 20 60 , CT V , [ 3] CT V . R FL P ( R est rict ion Frag- m ent Lengt h Poly mor phism ) DT BIA ( D irect T is su e Blot Imm uno assay) RT- Qp cr ( Reverse T ranscrip- [ 4] t ion A nd Qu ant itat ive P CR) .