专题2微生物的培养.pptVIP

* 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ★课题目标 利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生 产生活中有关微生物的计数 ★课题重点 对土样的选取和选择培养基的配制 ★课题难点 对分解尿素的细菌的计数 一、研究思路 （一）筛选菌株 1．实验室中微生物的筛选应用的原理：主要是指人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。 2．土壤中分解尿素的细菌的分离和计数所需培养基即只含有以尿素为唯一氮源的培养基，理论上只有能合成尿酶的细菌才能分解尿素获得氮源。 3．选择培养基：在生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 （二）统计菌落数目 统计菌落数目的方法主要有显微镜计数法和稀释涂布平板法。 1．（1）显微镜计数法 原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，再显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 (不能区分细菌的死活） （2）稀释涂布平板法 1）原理：当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 2）为保证统计结果准确，一般需要设置3-5个平板，应选择菌数再30-300的平板进行计数，并取平均值。 (活菌计数法) 在做分离土壤中分解尿素细菌的实验时，有位同学将0.1ml的稀释倍数为106的菌液分别涂布在了三个平板上，统计的菌落数分别为213、198 、249，每克土壤样品中微生物的个数为_____ 平均的菌落数=（213+198+249）÷3=220 2×109 3）从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是【平均菌落数÷涂布的稀释液体积（ml）】 ×稀释倍数。 每克样品中的微生物个数=（220÷0.1ml）× 106=2×109 （三）设置对照 1．设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验的影响，提高实验结果的可信度。 2．对照实验是指对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。 二、实验设计 实验设计的内容包括对实验方案，所需仪器、材料、用具和药品，具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。 1．土壤微生物主要分布在距地表 _________ 的接近 _性土壤中，约为_______细菌。 2． 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因_______________________ ，其目的是保证获得菌落数在 _________之间、适于计数的平板。细菌稀释度为________ ，放线菌稀释度为 _________ ，真菌稀释度为 _________ 。 3～8cm 70％～80％ 不同微生物在土壤中含量不同 30～300 104、105、 106 103、104、105 103、104、105 中 * * *