流动分析法测定烟草中的酚类化合物含量.docVIP

流动分析法测定烟草中的酚类化合物含量 　　摘要：为建立连续流动测定烟草中酚类物质总量的方法，研究了流动分析模块中氨溶液、显色剂、缓冲溶液和样品液的管径组合与样品的前处理方式。结果表明，氨溶液、显色剂、缓冲溶液和样品液的合理管径分别是0.16、0.60、0.42、0.60mL/min，样品的较好处理方式是热水浴中萃取样品45min，回收率为97.5%～102.9%，RSD=0.80%。 　　关键词：流动分析法；烟草；酚类化合物；测定方法 　　中图分类号：TS411.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）09-2353-03 　　烟草中的酚类化合物种类繁多，按照羟基数目的不同，可分为简单酚类和多酚，其中简单酚含量极微。多酚类物质在调制过程中会因为过度的氧化使烟叶发生棕色化反应，这不但会影响烟叶的外观质量，也会使内部有利品质成分减少。如果比例不协调，就会导致内在质量变差。与对烟叶颜色的影响相反，一般认为多酚类物质在烟草燃吸时产生的酸性反应能够中和部分碱性，使吃味更醇和，所以多酚类物质被认为是产生烟草香气的主要成分之一，而绿原酸通常是烟叶中存在最多的多酚。测定烟叶中的酚类物质有助于了解烟草香气质量，对于指导卷烟配方设计有重要的意义。检测酚类物质使用较多的是色谱法，基本是针对其各组分的单独测定。连续流动法具有操作简单、检测速度快等特点，可以满足大批量检测需求。在烟草化学成分检测分析领域内已经得到了广泛的应用，本研究对连续流动分析法测定烟草中酚类物质的总量进行探讨。 　　1 材料与方法 　　1，1 试剂、材料与仪器 　　羟甲基纤维素钠（AR，国药集团化学试剂有限公司）；柠檬酸铁氨（AR，天津市大茂化学试剂厂）；乙二胺四乙酸二钠（AR，重庆川东化工有限公司化学试剂厂）：无水乙醇（AR，重庆吉元化学有限公司）：聚乙氧基月桂醚溶液（30%，荷兰SKALAR公司）；绿原酸（98%，上海将来生化试剂有限公司）。 　　SKALAR流动分析仪及其附件（荷兰SKALAR公司）；AX504分析天平（感量0.0001g。瑞士梅特勒公司）：P270普通摇床（中国科学院武汉科学仪器厂）；ZHWY-110X30恒温水浴摇床（上海智城分析仪器制造有限公司）；THD-M1超声波发生器（深圳市科工达超声设备有限公司）。 　　1.2 样品的处理和分析 　　称取0.5g左右烟末样品，置于150mL具塞三角瓶中，加入50mL蒸馏水，放入85℃的恒温水浴摇床中萃取45min。然后将样品冷却到室温，过滤，取滤液用于流动分析检测。烟草总酚含量检测的原理是，样品中的酚类物质与羧甲基纤维素钠和乙二胺四乙酸二钠所组成的缓冲溶液混合在一起，后与柠檬酸铁氨在碱性条件下反应，生成一种红色的染料，该物质在600nm处有最强吸收峰，以绿原酸作为标准物质，基于此对烟草中的总酚含量进行测量，检测结果以绿原酸计。 　　2 结果与分析 　　2.1 检测波长的选择 　　准确移取绿原酸标准溶液5mL于50mL容量瓶中。加入5mL显色剂、10mL缓冲溶液、5mL氨溶液，再用蒸馏水稀释至刻度，静置10min。以相应的试剂空白作参比，在波长400-800nm内进行扫描（图1）。从图1中可以看出溶液最大吸收波长为605nm，所以选择600nm作为测定波长。 　　2.2 流动分析模块的设计 　　根据烟草总酚检测方法的原理，初步设计的流动分析模块见图2。 　　为确定总酚流动分析中氨溶液、显色剂、缓冲溶液和样品液输入量的合理搭配，筛选出检测中样品响应的最高值与基线波动的比值足够大，以期避免基线的波动对检测结果产生干扰，对其管径进行均匀试验。 　　2.2.1 均匀试验设计 选定的试验因素为氨溶液、显色剂、缓冲溶液和样品液的管径；试验水平为0.16、0.32、0.42、0.60mL/min等4种大小的管径，试验方案见表1。 　　2.2.2 均匀试验及分析 按照均匀设计的管径组合，进行流动分析模块的组装，并进行试验，试验相关结果见表2。 　　依据均匀试验结果，利用DPS数据处理软件，参照文献的方法，对各种试剂的管径和峰高比进行多项式回归，通过最高目标值回归得出的参数组合见表3，表中所列出的条件为峰高比最大的理论上的参数及根据实际情况选择的验证试验的条件。 　　从验证试验的结果看，验证1的比值为37.9，较验证2的25.3效果更好。所以确定接入分析模块中的氨溶液、显色剂、缓冲溶液和样品液的管径分别为0.16、0.60、0.42、0.60mL/min，该组合能够保证检测数据的稳定性。 　　2.3 样品前处理方法的选择 　　称取0.5g左右的烟草样品于150mL具塞三角瓶中，加入50mL蒸馏水，分别采用恒温水浴、超声波、摇床等3种萃取方式，分别萃取30、45、6