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月季抗根癌病和根腐病复合砧木的预选.doc
月季抗根癌病和根腐病复合砧木的预选 摘要:为获得抗月季根癌病、根腐病复合砧木品种,以R及4倍体蔷薇杂交获得的3株杂交后代为试材,进行了根癌病、根腐病抗性鉴定、扦插成活率及嫁接亲和性试验。结果表明,3株杂交后代的肿瘤形成率约为20%,具有较强的根癌病抗性;插穗褐变度为20%左右,显著低于感病品种R,具有较强的根腐病抗性;扦插成活率为70%左右,达到了生产上的要求;杂种后代R 5嫁接成活率为80%,其他两个后代达到了100%。结合枝条综合性状考虑,杂交后代R. hybrida×multiflora F1 No.1生长势强,枝条伸长性好,少刺,有望成为抗月季根癌病、根腐病的复合砧木品种。 关键词:月季根癌病;根腐病;砧木 中图分类号:S685.12+4 文献标识码:A 文章编号:0439- 近年来,月季(Rosa hybrida Hort.)的根癌病和根腐病对花卉生产造成了极大的危害。月季根癌病是由根癌土壤杆菌[Rhizobium radiobacter(Bei. et Van Deldan) Prilzam][1]引起的一种土传根系病害,一旦感染,会扩散至植物全株,导致植株生长迟缓,生长势减弱,而且目前还没有办法防除。月季根腐病于2001年在日本被发现,是由Pythium helicoides Drechsler引起的一种高温型土传根系病害[2],一旦感染,根部褐变,叶片黄化,最终导致植株死亡。在花卉育种领域,抗病育种与高观赏价值育种同样被越来越多的科学家所重视;抗性品种的育成,不仅可以减少农药的使用,在栽培方面还可以节省人力物力,这对于发展可持续性环保型农业具有极大地推动作用。在月季生产中,国外已广泛应用了嫁接苗,嫁接植株在生物产量、冠幅及抗病害等方面都高于自根繁殖植株;繁殖月季嫁接苗在中国的推广也必将成为一种趋势,并且抗病砧木的应用,无论月季接穗品种有无抗病性,都能使其在病害防治方面具有可能。因此,选育抗病砧木品种成为当前月季应用研究的重要课题。筛选对月季根癌病表现出一定抗性的砧木品种虽然有报道[3-5],但在实际生产应用中,却未见普及。周林等[6]利用组织培养幼苗接种法对24个切花月季品种进行根癌病鉴定,发现R. hybrida cv. PEKcougel对根癌病表现出极高的抗性,并且抗性能够遗传给后代;而R. hybrida cv. Dukat和R. hybrida cv. Golden Emblem为易感品种[7]。在月季根腐病方面,虽然蔷薇(R. multiflora Thunb.)品种R. multiflora cv. Matsushima No.3对根腐病具有很强的抗性[8],但由于枝条细弱,不适合嫁接,而未能推广。因此,试验利用R. hybrida cv. PEKcougel对根癌病的抗性与R. multiflora cv. Matsushima No.3对根腐病的抗性,将这2个品种进行正、反杂交,并利用胚挽救技术,得到杂交后代;然后对获得的杂交后代进行根癌病、根腐病抗性评价,通过无性繁殖及嫁接亲和性试验,筛选抗根癌病、根腐病的后代,现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 供试材料 2009年5月, 以R. hybrida cv. PEKcougel为母本,4倍体R. multiflora cv. Matsushima No.3为父本[9],进行了人工杂交授粉,再利用胚挽救技术成功获得杂种后代,并利用R. multiflora特异引物SCAK16[10]进行杂种鉴定,最终确认获得了3株杂交后代,即R. hybrida×multiflora F1 No.1、R. hybrida×multiflora F1 No.5、R. hybrida×multiflora F1 No.6。 1.2 根癌病抗性鉴定 1.2.1 供试菌株 供试菌株为日本国岐阜县从月季肿瘤分离得到的根癌土壤杆菌R. radiobacter菌株GOU1[6],原菌活化采用YEB培养基(Bacto牛肉膏5 g/L+Bacto酵母提取物1 g/L+蛋白胨5 g/L+蔗糖5 g/L+MgSO4?7H2O 0.493 g/L,pH 7.2),活化后菌液浓度为1.0×1010个/mL。 1.2.2 接种 接种鉴定法为岐阜大学开发的瓶外浸蘸法。根癌病鉴定的抗病对照品种为R. hybrida cv. PEKcougel,感病对照品种为R. hybrida cv. Dukat。选择杂交后代从植株根部发出的15~25 cm长新梢,从上部完全展开的幼叶开始,把向下的头2个节间作为鉴定材料。样品用洗洁精溶液清洗,再用流水冲洗20 min,然后用70%乙醇灭菌1 min,于超净工作台内,先用1% N
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