氨基酸、多肽与蛋白质.ppt

造成变性的因素 变性的本质 —— 破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 应用举例 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性 。 蛋白质的复性(renaturation) 天然状态，有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态，无活性 在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。 变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但并不变性。 蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块，此凝块不易再溶于强酸和强碱中。 蛋白质沉淀 蛋白质的凝固作用(protein coagulation) 四、蛋白质在紫外光谱区有特征性吸收峰 由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系，因此可作蛋白质定量测定。 五、蛋白质呈色反应可用于溶液蛋白质测定 （一）蛋白质经水解后产生茚三酮反应 蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应(ninhydrin reaction) 。 （二）肽链中的肽键可与双缩脲试剂反应 蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双缩脲反应(biuret reaction) 。 双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。 蛋白质的分离、纯化、鉴定 和结构分析 Isolation, Purification, Identification and Structural Analysis of Proteins 第五节 第六节 血浆蛋白质 Plasma Proteins 一、采用电泳法可将血浆蛋白质分成若干组分 电泳法是分离、分析血浆蛋白质的主要方法。采用醋酸纤维素膜电泳，可将血浆蛋白质分为5个组分。 按泳动快慢依次为：清蛋白、α1-、α2-、β-和γ-球蛋白（globulin）。而采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)可将血浆蛋白分离出100种以上。 ? ? 白蛋白 ?1 ?2 ? ? 血浆蛋白的电泳图 血浆蛋白质主要成分及功能 功 能 血浆蛋白质 抗蛋白酶 抗凝乳蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶、α2-巨球蛋白、抗凝血酶 血液凝固 各种凝血因子、纤维蛋白原 酶 血液中功能酶：如凝血因子、胆碱酯酶 组织细胞漏出的酶：如转氨酶 激素 红细胞生成素 免疫功能 γ-免疫球蛋白、补体蛋白、β2-微球蛋白 参与炎症反应 急性时相反应蛋白：如C反应蛋白、α1-酸性糖蛋白（血清类黏蛋白） 肿瘤胚胎性蛋白 α1甲胎蛋白（AFP） 转运或结合蛋白 清蛋白——结合、运输胆红素、非酯化脂肪酸、离子（Ca2＋），金属离子（Cu2＋、Zn2＋）、正铁血红素、类固醇激素和各种药物分子 血浆铜蓝蛋白——含有Cu2＋（但Cu2＋转运可能主要依赖清蛋白） 皮质类固醇结合球蛋白（运皮质激素蛋白）——结合皮质醇 结合珠蛋白——结合细胞外的血红蛋白 脂蛋白（乳糜微粒、VLDL、LDL、HDL）——运输甘油三酯、胆固醇、磷脂等 血红素结合蛋白——结合血红素 视黄醇结合蛋白——结合视黄醇 性激素结合球蛋白——结合睾酮、雌二醇 甲状腺素结合球蛋白——结合T3、T4 运铁蛋白——运输铁 甲状腺素运载蛋白——结合T4并与视黄醇结合蛋白形成复合物 二、血浆中大多数蛋白质具有特殊的 生物学功能 （一）血浆蛋白质大多数属于分泌性蛋白质 （二）清蛋白是血浆中含量最多的蛋白质 血浆渗透压75-80% 结合、转运物质 （三）很多血浆蛋白具有特殊的结合功能 1．前清蛋白运输视黄醇 2．运铁蛋白是铁的转运载体 3．甲状腺素结合球蛋白运输甲状腺素 4．结合珠蛋白-血红蛋白复合物可防止血红 蛋白在肾小管沉积 5．血浆铜蓝蛋白可结合铜 6．免疫球蛋白与机体的防御机制 要点 氨基酸 L-?- 三字符号 分类 等电点 测定基础 蛋白质 肽键、寡肽、多肽 四层次结构 模体、结构域 结构与功能的关系 等电点 测定基础 * Gly * 羊毛和真丝弹性比较 1978年从非洲爪蟾卵细胞和卵母细胞中分离出来,是爪蟾卵母细胞核中含量最丰富的蛋白,大约构成整个核蛋白的7%至10%，当时的描述是:一种酸性