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CYP3A酶内源性标志物的研究进度 　　随着精准医疗的提出，药物治疗的个体差异受到越来越多的重视，这要求在药物的研发及应用中密切关注患者药物代谢酶的活性及联合用药对酶活性的影响。CYP3A 酶参与临床约50%药物的代谢，咪达唑仑、红霉素、氨苯砜、奎宁等典型的体外探针药物广泛应用于CYP3A酶活性评价及药物相互作用研究。然而，这需要受试者在口服或注射探针药物的同时监测血药浓度，额外的非治疗作用给药和频繁的采血使得这一方法无法在小儿、老年、肿瘤等特殊患者中应用。CYP3A酶参与机体内源性物质胆固醇(cholesterol，C)和氢化可的松(cortisol，F)代谢生成4beta;-羟基胆固醇(4beta;-hydroxycholesterol，4beta;-OHC)和6beta;-羟基氢化可的松(6beta;-hydroxycortisol，6beta;-OHF)，二者均可作为CYP3A酶的活性标志物。由于内源性标志物检测具有较好的有效性、可行性和无创性，近年广泛应用于CYP3A酶活性评价。本文对上述两种常用内源性标志物的相关研究和临床应用进行综述。 　　1　CYP3A酶简介　　CYP3A酶参与机体内源性物质和外源性物质的生物转化，在调节机体与外环境的相互作用以及保持机体内环境稳态中发挥重要作用。CYP3A酶活性受多种因素影响，例如遗传多态性、机体生理或病理状态以及合并用药情况，尤以遗传多态性最为显著。CYP3A酶有3A4、3A5、3A7和3A43　4个亚型，成人CYP3A酶分别占肝脏和小肠总P450酶的40%和80%，以3A4和3A5为主。CYP3A酶活性是CYP3A 基因家族总体活性的体现，3A5在亚洲人群中的突变率高于3A4，它的遗传多态性成为亚裔人群个体间药物代谢差异的重要影响因素。在中国人群中CYP3A5*3突变频率较高，为73%，该位点的单核苷酸多态性(SNP)会导致剪接异常和蛋白截短，从而引起CYP3A5酶的多样性表达，CYP3A5*3个体中3A5的表达量仅为野生型CYP3A5*1个体的十分之一。 　　2　4beta;-OHC及其相关代谢物简介　　4beta;-OHC是胆固醇通过CYP3A4酶和CYP3A5酶催化生成的内源性氧化物，在血中以胆固醇酯形式存在，通过缓慢的7alpha;羟基化反应进行消除，该指标不受肾排泄功能和体内胆固醇水平的影响，因此在临床试验中常作为CYP3A 酶内源性标志物评价酶活性。同时，由胆固醇不经过CYP3A酶催化的氧化作用生成的4alpha;-羟基胆固醇，通常被作为校正参数对4beta;-OHC临床检测结果进行补充说明。除此以外，血浆或血清中4beta;-OHC浓度(C4beta;-OHC)和4beta;-羟基胆固醇/胆固醇比值(R4beta;-OHC/C)也是常用的评价指标。　与经典外源性探针药物CYP3A酶抑制剂咪达唑仑相比，4beta;-OHC与咪达唑仑体内清除过程具有较好的相关性，但其在体内的变化灵敏度较探针药物略弱。4beta;-OHC指示药物对酶诱导作用的灵敏度高于对酶抑制作用，例如不同强度的酶诱导药物作用2周后，4beta;-OHC的含量均可检测到有意义的改变，但此种改变仅在强效酶抑制药物作用下才可发生。Kasichayanula等[20]研究酮康唑及利福平对血浆4beta;-OHC含量的影响，结果发现停药2周后，酮康唑组4beta;-OHC含量降低后可回归基线值，而利福平组4beta;-OHC含量仍比基线值高60%，该研究认为血浆4beta;-OHC含量降低40%可判断药物对酶有抑制作用。由于4beta;-OHC 半衰期较长，约17d，即使给药5d后能够发现4beta;-OHC水平明显上升，但较准确的4beta;-OHC的含量检测至少需要服药2周后进行，确保服用酶诱导剂或抑制剂后胆固醇和4beta;-OHC浓度已经达到新的平稳状态。 　　3　6beta;-OHF及其相关代谢物简介　　氢化可的松在体内通过CYP3A酶介导发生羟基化反应生成alpha;/beta;2种构型的6-羟基氢化可的松，由于氢化可的松及其羟基化代谢物主要以非结合形式通过肾脏排泄，可以直接检测尿中6beta;-OHF与其原型氢化可的松进行分析。尿液中6beta;-OHF与氢化可的松的比值(R6beta;-OHF/F)在很多研究中应用于CYP3A 酶活性评价，具有较好的临床意义。除此以外，氢化可的松的生成清除率CLm(6beta;-OHF)亦可作为标志物评价CYP3A酶活性，该指标在男性健康受试者中与咪达唑仑肾清除率有显著的相关性。由于氢化可的松和可的松(cortisone　E)可以通过11beta;-羟固醇脱氢酶在体内相互转化，且不同个体间没有固定的转化比例，因此有学者 将二者纳入分析，认为