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微生物的实验室培养
专题2 :微生物的培养与应用
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微生物包括哪五类:
病毒
细菌
放线菌
真菌
原生生物
原核生物
原生生物
真菌
病毒界
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一、培养基分类:
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选择培养基
加入青霉素的培养基:
分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基:
分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基:
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基:
分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基:
分离导入了目的基因的受体细胞
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鉴别培养基
伊红-美蓝培养基:
鉴别大肠杆菌
酚红培养基:
鉴别分解尿素的细菌
刚果红培养基:
鉴别分解纤维素的细菌
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二、培养基的基本成分
1.基本成分:
碳源、氮源、水、无机盐
⑴碳源
无机碳源:
有机碳源:
CO2、HCO3-
牛肉膏、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
⑵氮源
无机氮源:
有机氮源:
NH4+、NO3-(为硝化细菌提供N源和能源)
牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
2.生长因子:
维生素、氨基酸、碱基等
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三、消毒与灭菌
消毒:指使用较为温和的物理或化学方法
仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害
的微生物(不包括芽孢和孢子)。
灭菌:指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
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有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌
细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。
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消毒的方法:
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、紫外线或化学药物消毒
3、化学药剂消毒法:用70%酒精等进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min
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灭菌的方法:
1、灼烧灭菌
2、干热灭菌:160-170 ℃
下加热1-2h。
3、高压蒸汽灭菌:100kPa、
121 ℃下维持15-30min.
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四、实验操作
㈠ 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
1.计算:
培养基用量
依配方计算各成分的用量
2.称量:
3.溶化:
牛肉膏黏稠,用称量纸称取
牛肉膏、蛋白胨易吸潮,要快、加盖
牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解
→取纸
→蛋白胨、NaCl
→琼脂
→补水定容
4.灭菌:
5.倒平板:
培养基、培养皿
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1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
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3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平
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