第四章培养基的制作.pptVIP

（一）营养液制作　1.　准备工作 * 第四章 培养基的制作 第一节 母种培养基制作 第二节 原种、栽培种培养基制作 第三节 液体菌种制作技术 教学目的：熟练掌握各级培养基 的制作方法 。 教学重点：培养基的制作方法 。 第一节 　母种培养基的制作 一、菌种培养基 (一)按营养物质种类分类 l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。适合于各类微生物的生长 2.合成培养基 是指用已知成分和数量的化合物配制而成的培养基。适用研究 3.半合成培养基 利用天然物质作为碳、氮源及维生素的来源另加一些无机盐类配制而成 (二)按培养基的物理状态分类 1.液体培养基 不加琼脂，多用于生理生化方面研究,培养 液体菌种等。 2.固体培养基 　凝固剂的量,琼脂冬季为1.5%--2.0%,夏 季2.2%--2.3%。 3.半固体培养基 　含有较少量琼脂(0.2%--0.5%)的培养基, 使培养基未达到固态而呈粘稠状态。 二、母种培养基配方： 1.土豆200g、糖20g、琼脂18g、水1000ml 2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）。此配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、灵芝生长尤其茁壮。可作黑木耳复壮培养基。 3.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mL），平菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长。做平菇的复壮培养基效果显著。 4.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）1片，香菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长，可做香菇的复壮培养基，效果显著。 三、制作方法 2.　称量、材料预处理 　　按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量200g，切成1cm见方的小块。琼脂剪碎后用水浸泡。 3.　熬煮 　　将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中，煮至酥而不烂。 4.　过滤、加可溶药物 　 用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加 入糖 5.　熬琼脂、定容 　　 在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全溶化为止，定容至1000ml。 （二）营养液分装 　 1.　用注射器分装 　 2.　分装标准:分装量为试管长度的1/4—1/5。注意培养基不能沾污试管口。 3.塞棉塞 　　棉塞松紧适度，1/3在管外，2/3在管内。 4.扎捆 　　7-10支试管捆在一起，棉塞上包好防水纸，直立放入高压灭菌锅中。 (四)　摆斜面 　　灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2 （三）灭菌处理 在1.0—1.5 kg/cm2压力下维持20--30min。 (四)　摆斜面 　　灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2 第二节 原种、栽培种培养基制作 一、常见原种配方 ①木屑培养基配方 细木屑80%，麸皮12%，玉米面1%，黄豆粉2%，过磷酸钙1.5%，红糖0.5%，尿素0.4%，硫酸镁0.1%，石灰1%，石膏2%，料：水=1：1.0-1.2。此配方适合香菇、黑木耳、平菇原种生长，菌丝粗壮洁白。 ②玉米芯培养基配方 玉米芯80%，麸皮14%，糖0.5%，过磷酸钙1%，石灰2%，尿素0.5%，玉米面2%，料：水=1：1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种，菌丝生长速度快，且菌丝粗状。 ③玉米芯、木屑混合培养基配方 玉米芯42%，木屑20%，豆秸20%，麸皮10%，过磷酸钙1.5%，石灰2%，石膏1%，糖0.5%，玉米面3%，料：水1=1：1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种。生长健壮，也可培养金针菇，滑子蘑原种。 ④软质木屑配方 椴木屑75%（木线厂下脚料，颗粒较大），麸皮15%，玉米面5%，石膏1.5%，石灰1%，糖0.5%，过磷酸钙1.5%，尿素0.5%，料，水=1：1.2左右。适用于金针菇，滑子蘑等分解基质能力较弱的品种使用。 ⑤麦粒、木屑培养基配方 新鲜、优质小麦80%，阔叶树木屑20%，木屑：水=