仪器分析实验项目1.docVIP

实验一 苯及其衍生物的紫外吸收光谱的测绘 及溶剂对紫外吸收光谱的影响 一、实验目的 (1) 学习苯以及苯的一取代物的紫外吸收光谱的测绘。 (2) 了解不同助色团对苯的紫外吸收光谱的影响。 (3) 观察溶剂极性对丁酮、异亚丙基丙酮的吸收光谱以及pH对苯酚吸收光谱的影响。 (4) 学习并掌握756MC型紫外可见分光光度计的使用方法。 二、实验原理 具有不饱和结构的有机化合物，特别是芳香族化合物，在近紫外区(200～400nm)有特征吸收，为鉴定有机化合物提供了有用的信息。方法是比较未知物与纯的已知化合物在相同条件(溶剂、浓度、pH值、温度等)下绘制的吸收光谱，或将绘制的未知物的吸收光谱与标准谱图(如sadtler紫外光谱图)相比较，如果两者一致，说明至少它们的生色团和分子母核是相同的。 苯在230～270 nm之间出现的有精细结构的B带是其特征吸收峰，中心在254 nm附近，其最大吸收峰常随苯环上取代基不同而发生位移。 三、仪器与试剂 1. 仪器 756MC型紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂）；带盖石英吸收池(1cm)。10mL具塞比色管3支；5 mL具塞比色管10支；1 mL吸量管6支；0.1mL吸量管2支。 2. 试剂 苯；乙醇；环己烷；氯仿；丁酮；异亚丙基丙酮；正己烷。0. 1 mol. L-1 HCl, 0. 1 mol. L-1 NaOH。 苯的环己烷溶液((1+250)；甲苯的环己烷溶液((1+250)；苯酚的环己烷溶液(0.3 mg.mL-1)；苯甲酸的环己烷溶液(0. 8 mg.mL-1)；苯胺的环己烷溶液(1+3000)；苯酚的水溶液(0. 4 mg.mL-1)。 异亚丙基丙酮，分别用水、氯仿、正己烷配成浓度为0. 4 mg.mL-1的溶液。 四、实验内容 1. 苯及其一取代物的吸收光谱的测绘 (1) 在石英吸收池中，加入两滴苯，加盖，用手心温热吸收池下方片刻，在紫外分光光度计上，相对石英吸收池，从220～300nm进行波长扫描，得到吸收光谱。 (2) 在5支5mL具塞比色管中，分别加入苯、甲苯、苯酚、苯甲酸、苯胺的环己烷溶液0. 50 mL，用环己烷稀释至刻度，摇匀。在带盖的石英吸收池中，相对环己烷，从220～320 nm进行波长扫描，得到吸收光谱。 观察各吸收光谱的图形，找出其λmax，并算出各取代基使苯的λmax红移了多少。 2. 溶剂性质对紫外吸收光谱的影响 (1) 溶剂极性对n→π跃迁的影响：在3支5 mL具塞比色管中，各加入0.02 mL丁酮，分别用水、乙醇、氯仿稀释至刻度，摇匀。用石英吸收池，相对各自的溶剂，从220～350 nm进行波长扫描，得到吸收光谱。比较它们的λmax的变化，并解释之。 (2) 溶剂极性对π→π*跃迁的影响：在3支l0 mL具塞比色管中，依次加入0. 20 mL分别用水、氯仿、正己烷配制的异亚丙基丙酮溶液，并分别用水、氯仿、正己烷稀释至刻度，摇匀。用石英吸收池，相对各自的溶剂，从200～300 nm进行波长扫描，得到吸收光谱。比较吸收光谱λmax的变化，并解释之。 (3) 溶液的酸碱性对苯酚吸收光谱的影响：在2支5 mL具塞比色管中，各加入苯酚的水溶液0. 50 mL，分别用0. 1 mo1.L-1 HCl， 0. 1 mo1.L-1 NaOH溶液稀释至刻度，摇匀。用石英吸收池，相对水，从220-350 nm进行波长扫描，得到吸收光谱。比较吸收光谱的λmax的变化，并解释之。 五、思考题 1. 分子中哪类电子的跃迁将会产生紫外吸收光谱？ 2. 为什么溶剂极性增大，n→π*跃迁产生的吸收带发生紫移，而π→π*跃迁产生的吸收带则发生红移？ 实验 二 荧光分光光度法测定维生素 B2 一、实验目的 1、学习荧光分析法的基本原理 2、了解荧光分光光度计的构造，掌握其使用方法。 二、实验原理 在一定波长紫外光的照射下，维生素 B2会发出荧光。在 PH6－7 的溶液中荧光最强，在 PH11时荧光消失。在低浓度时，溶液的荧光强度与溶液中荧光物质的浓度呈线性关系。因此，选择荧光峰值波长为测量波长，测量维生素 B2 溶液的荧光强度，可对维生素 B2进行定量分析。本实验采用标准曲线法来测定维生素B2的含量。 三、仪器与试剂 仪器 960型荧光分光光度计、比色皿 1个、50ml 容量瓶 6 个、5.0ml吸量管 1 支 试剂 维生素B2标准溶液、1％醋酸溶液、维生素 B2样品溶液 四、实验内容 1、配置标准溶液（实验室准备） （1）维生素 B2标准溶液：取维生素 B2约 10mg，精密称定，置1000ml 容量瓶中，用1％醋酸溶解并稀释至刻度。再精密量取此溶液 1.0、2