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手把手教你半对数作图.doc
手把手教你半对数作图 酶联免疫法(ELISA)是农兽残分析中常用的一种检测方法,该方法具有操作简单、高通量、仪器配置要求低、灵敏度高等特点。而且最近几年ELISA检测试剂盒的质量也有了很大提高,假阳性率也相对较低。因此ELISA法在很多实验室得到了广泛的应用。在使用酶联免疫法检测农兽药残留的过程中,存在一个较为普遍的问题,就是很多实验人员操作很熟练,但是对最后进行结果计算却不是太熟练。这主要是在进行结果计算时,ELISA要求进行半对数作图,而很多实验人员对此不了解,在这里以荷兰euro-proxima氯霉素检测试剂盒的检测数据为例,讲讲怎么进行半对数作图,怎么对酶联免疫法的检测结果进行处理。 假如实验得到第2列的检测数值,按照试剂盒的要求对吸光度值进行转换,即将标准品和样品的吸光度值除以零标准的吸光度值,再乘以100%(第三列),见下表: 浓度值(ppb) 吸光度值 吸光度值百分比(%) 0 2.282 0.025 2.261 99.1 0.05 1.949 85.4 0.1 1.682 73.7 0.2 1.413 61.9 0.5 0.879 38.5 2 0.375 16.4 样品1 0.524 23.0 样品2 1.666 73.0 下面将根据以上的数据用excel进行作图,首先选定浓度值和对应的吸光度百分比值。 点击图表向导按钮,选择XY散点图,见下图 点击下一步: 再点击下一步, 在图表标题栏可以输入标题,再点击下一步, 点击完成,得以下图表: 下一步注意了,比较关键,右键点击X坐标轴,选择坐标轴格式: 然后在对数刻度前打勾,在数值(Y)轴内交叉于(C)对应的数值框内填入0.01,见下图 点击确定,即可得半对数图,见下图 再右键点击上图内的蓝色数据点,选择添加趋势线, 有下图: 在类型栏选择对数,在选项栏的显示公式和显示R平方值选项前打勾,点击确定, 最后得到下图,在这个图中有计算公式,需要注意的是得到的这个公式其Y轴为吸光度值,X轴为氯霉素浓度值,而我们检测得到是吸光度值,需要求得是氯霉素浓度值,因此计算的时候需要对这个公式进行变换。 下面以一个数据为例,根据氯霉素的吸光度值求其浓度值,下图中H11单元格内的吸光度百分比值为22.96,在对应的G11单元格内输入公式“=EXP((28.686-H11)/19.152)”,这个公式是根据图内公式变换而来的,可求得对应的氯霉素浓度为:1.3ppb。
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