山梨酸苯甲酸实验报告.docVIP

酱油中山梨酸、苯甲酸含量的测定 概述：防腐剂是指能防止食品腐败、变质，抑制食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂。 目前，我国允许使用的品种主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢乙酸等。 第一部分、苯甲酸 一、实验原理：苯甲酸及苯甲酸钠在近紫外光区具有较强的吸收。通过查找资料，苯甲酸在230nm处具有最大吸收。另一方面，它在水中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成水溶液，采用紫外分光光度计，通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸（钠）含量的测定。 二、实验试剂及器材 试剂：无水乙醚 (回收后可重复使用)、苯甲酸标准液(1mg/ml)、5%NaHCO3溶液、5%NaCL溶液、(1+2v)盐酸溶液 器材：紫外分光光度计、125ml分液漏斗×2，铁架台一套，量筒100ml、容量瓶（100ml、50ml、）移液管（5ml×2、1ml×2）、胶头滴管、试剂瓶100ml×2、水浴锅、蒸馏回流装置一套。 三、实验步骤： 1、试剂准备：标准液：125.0mg苯甲酸+250ml无水乙醚 5%NaHCO3：5.0g NaHCO3+100mlH2O (1+2)HCl：20ml浓盐酸+40mlH2O 2、样品的处理：取酱油5.00ml于125nl分液漏斗中加入（1+2）盐酸2ml酸化，再用无水乙醚萃取三次，每次用量30ml，每次振摇1min。合并乙醚层于另一分液漏斗，用5%NaCl溶液洗涤二次，每次5—10ml，然后蒸馏回收乙醚，用20ml、5%NaHCO3溶解、定容到100ml容量瓶中。备用。 3、标准曲线绘制：取苯甲酸标准使用液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml分别置于100ml容量瓶中，各加入5%NaHCO3溶液2ml，(1+2v)盐酸溶液2ml，加水至刻度，摇匀。放置15min,尽量让CO2逸尽。 用1cm吸收池于波长230nm处测定其吸光度。以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线。 4、取样品处理液5ml于100ml容量瓶中加入(1+2v)盐酸溶液2ml,摇荡以排除CO2，加水至刻度、摇匀、放置15min，与标准系列一起进行比色测定，根据测得吸光度，在标准曲线上查出其对应量，就可以计算出样品中苯甲酸（钠）的含量。 四、数据处理： 计算每g／ml样品中苯甲酸含量 样品 V/ml 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 NaHCO3 2 2 2 2 2 2 2 HCl 2 2 2 2 2 2 2 吸光度 0 0.092 0.187 0.368 0.542 0.731 0.457 结果计算：0.1ml转化成浓度为0.005mg/L，样品吸光值代入得 0.025mg/L 苯甲酸含量=0.025mg/L×样品稀释倍数20×（100ml/5ml）=10.0mg/L 实验结果分析：本实验测得 该酱油中的苯甲酸含量为10.0mg/L，高于国标中最低检出浓度1 mg／kgGB／T 5009．29—1996 二、实验试剂及器材： 试剂：三氯甲烷：以三氯甲烷体积50％的碳酸氢钠(0.5mol/L)提取2次，而后以无水硫酸钠干燥，过滤备用。 0.5mol/L碳酸氢钠：称取21g碳酸氢钠于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解，移至500mL容量瓶中加水定容至刻度 0.3mol/L碳酸氢钠：25.2g碳酸氢钠+1000ml水 山梨酸标准溶液：准确称取250mg山梨酸，用0.3mol/L的碳酸氢钠定容至250mL 器材：紫外分光光度计，容量瓶（1000ml、250ml、50ml×6），移液管（5ml、1ml），锥形瓶250ml。 三、实验步骤： 1、样品处理：去酱油5ml于50ml容量瓶中用水定容，再从中取5ml于250ml分液漏斗中，加100ml（精确）三氯甲烷提取1min。分层后将氯仿层分至125ml锥形瓶中，加5g无水硫酸钠，备用。 2、标准曲线绘制：分别吸取山梨酸标准使用液0.0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25mL于50mL容量瓶中，用0.3mol/L碳酸氢钠定容。于紫外分光光计中254nm处测定吸光度，以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 3、取氯仿提取液50ml于125ml分液漏斗中，用50ml NaHCO3(0.3mol/L)溶液提取1min，分层，小心弃除氯仿层，将NaHCO3提取液于紫外分光光度计254nm处比色，根据测得吸光度，在标准曲线上查出其对应量，就可以计算出样品中山梨酸的含量。 四、数据处理： 计算每g／ml样品中山梨酸含量： 样品 V/ml