八宝景天组织培养试管花卉工艺试验.docVIP

试管花卉工艺实验设计方案 （八宝景天组织培养培育试管花卉） 实验背景：试管花卉是当前市场上较为流行的迷你携带花卉，因其植株小，长在精致的小试管或玻璃瓶内而得名，它是利用植物克隆技术，在人工控制的相对或绝对无菌的环境条件下，将事先培养好的植物幼苗植株在拇指大的透明试管或玻璃瓶等相对密封空间里生长的一系列迷你微型植物总称。 前期准备：查阅文献得知八宝景天属于多浆类观叶植物，其外观别致，形态奇特，不畏干旱，不畏高温，不择环境，生命力极强的特点，是试管花卉的良好实验材料 形态特征 株高30～50cm。地下茎肥厚，地上茎簇生，粗壮而直立，全株略被白粉，呈灰绿色。叶轮生或对生，倒卵形，肉质，具波状齿。伞房花序密集如平头状，花序径10～13cm，花淡粉红色，常见栽培的尚有白色、紫红色、玫红色品种。 花期，7~10月，宿根花卉类。 生长习性 性喜强光和干燥、通风良好的环境，能耐－20℃的低温；喜排水良好的土壤，耐贫瘠和干旱，忌雨涝积水。植株强健，管理粗放。 栽培管理 景天类虽对土壤要求不严，但一般盆土宜用园土、粗砂和腐殖土混合配制，保证土壤的透气性。盆栽可置于光照充足处，保持叶色浓绿。生长季节浇水不可过多，掌握 间干间湿和宁干勿湿的原则。在栽培过程中，注意通风，防止病虫害发生。生长适温是：3～9月为13～20℃，9月至翌年3月为10～15℃。 繁殖 子播，分株，扦插繁殖，一般采用扦插，因该品种极易成活，可在圃地直接扦插浇水即可。 用途 绿化用途广泛，可栽花坛、花篱、花境，可单株点缀，也可以成片栽植。盆栽。百花。切花都是上等材料。 实验所需材料、仪器、试剂 八宝景天 健康幼嫩叶片 MS培养基 详见附表一 生长调节剂 6-BA(0.2mg/l) NAA(0.2mg/l) IBA(0.2mg/l) PH缓冲液 NAOH HCL 70%酒精 ------- 84消毒液 ------- 锥形瓶 90*50ml 其它 量筒，电子天平，电磁炉，平底锅，无菌操作台，镊子，剪刀，酒精灯，灭菌锅，红蓝墨水，组培室、、、、 实验具体方案： 第一次实验：培养基的配置(9*10*50 人/瓶/ml) 实验材料：蔗糖18*3g，脱乙酰基蓝糖胶4.2*3g，Fe盐3*3ml,大量元素3o*3ml,微量元素3*3ml,维生素3*3ml,肌醇3*3ml,甘氨酸3*3ml 50ml锥形瓶90个，1L烧杯3个，玻璃棒，吸耳球，量筒，电子天平，电磁炉，平底锅 实验步骤： 取料：在3个平底锅中分别加入3ml 铁盐，3ml大量元素，3ml微量元素，3ml维生素，3ml肌醇，3ml甘氨酸，再称取18g蔗糖，4.2g脱乙酰基蓝糖胶，植物生长调节剂6—BA(0.12ml,0.24ml,0.48ml;)与NAA,0.24ml加入2L水。 加热：点火加热平底锅，烧开，不停的搅拌（防止糊化）。 定容：将烧开的溶液转移至1L的大烧杯中，加蒸馏水定容至0.6L。 分装：将定容好的溶液倒入平底锅中，搅拌均匀后,分装到30个锥形瓶中，每个锥形瓶中加入20ml，封口做标志。 灭菌：将密封好的装有培养基的锥形瓶全部放入灭菌锅内经高温灭菌。（121℃,20分钟） 第二次实验：接种组培 实验材料：八宝景天，75%酒精，84消毒液，无菌操作台，镊子，剪 刀，酒精灯，锥形瓶（实验一中灭菌过的） 实验步骤： 取材：从花卉基地取生长状况良好的八宝景天植株若干(茎叶即可，注意不过分伤及原植株。采后的材料放入微湿的塑料袋内，不使其过分失水) 预处理：将取来的八宝景天叶片先在流水下清洗5min,再浸泡于70%酒精溶液中1min，取出后用无菌水冲洗。 无菌处理：将用酒精消毒了的八宝景天分为3组，用84消毒液按附表2消毒不同时间。 不定芽诱导：用无菌的滤纸吸干消毒后叶片表面水分，以MS为基本培养基添加6-BA和NAA，依附表二社不同浓度梯度，在超净台上按无菌操作要求接种。 培养观察：将接种好的八宝景天移至培养室，培养室条件：温度，15~17℃，光照，短日照，每天8小时。（期间有愈伤组织、不定芽、生根三阶段，分别按附表三记录统计）。 注意事项： 紫外灯对人有一定的伤害，注意关灯后再操作； 整个继代过程要求无菌操作，要求所有用具及材料都经严格消毒后方可使用。 第三次实验：观察并记录植株的生长状况 每隔3天到培养室观察一次八宝景天的生长状况，并记录其成活率及 长