微生物学实验教学大纲.docVIP

《食品微生物学》实验大纲 总学时： 24 学 分：1.5 面向专业：食品科学与工程（大类 ） 课程代码：先开课程：化学、生物化学等 课程性质：必修课 执笔人：宫春波 审定人：宫春波 孙庆杰 第一部分：实验教学部分 一、说明 1、本门课程实验的性质任务、目的与要求 本实验课是《食品微生物学》的重要组成部分，是《食品微生物学》课程的必修环节。在系统地学习了理论知识的同时，通过课程实验，使学生能掌握一定的基本实验技能；通过分析实验过程出现的各种现象和问题，培养学生分析问题和解决问题的能力；通过实验数据的分析处理以及实验报告的撰写，培养和训练学生的实际应用能力和组织报告的能力。本实验的开设要求实验室具备微生物实验要求的基本设备和相关测试仪器，同时要求学生具备化学、生物化学等基本理论知识。 2、本门课程实验项目设置情况 序号 实验名称 学时 必开 选开 实验类型 内容提要 验 证 基本操作 综合性、设计性 1 微生物的个体形态观察及群体形态特征的观察 2 √ √ 微生物涂片、染色的基本技术；显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术。 2 培养基的制备、灭菌以及无菌检测 4 √ √ 微生物培养基的制备；高压蒸汽灭菌技术和微生物接种技术 3 微生物个体大小测定 2 √ √ 4 微生物直接计数（血球板计数） 2 √ √ 5 微生物营养谱的测定 2 √ √ 确定微生物的营养谱系，针对营养缺陷菌株确定其特性。 6 环境因素对发酵微生物的影响及药敏实验 2 √ √ 紫外线、化学消毒剂对微生物生长的影响；微生物之间的相互作用。 7 微生物的选育及其鉴定、分类、命名 4 √ √ 微生物的纯种分离方法；菌种鉴定；微生物生产特性的测定及其检测。 8 基于培养介质的微生物消长的测定 4 √ √ 微生物生长曲线的测定绘制，微生物生长的影响因素及其程度的探索。 9 微生物遗传物质提取、鉴定实验 6 √ √ 微生物遗传物质的提取，检测及其测序比较。 10 原生质体融合技术杂交育种 二、各实验项目教学要求 实验一显微镜的构造、性能和使用方法 实验目的 1）掌握显微镜的构造、性能和使用方法，重点掌握普通光学显微镜油镜的使用。 2）了解和利用普通光学显微镜油镜对细菌、放线菌进行个体形态观察。 3）观察并比较不同来源的的微生物生长的数量和类型。 显微镜的光学系统中，有两组重要的透镜，这两组透镜虽然结构很复杂，但它们的作用都相当于一个凸透镜。凸镜的成像原理，也就是显微镜放大成像的光学原理。只不过是通过两次放大而已显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（152）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。环境中微生物的检测比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型设备1）仪器或其他用具：显微镜（带油镜头，每人1台）、擦镜纸、棉签、废物缸等。 （2）溶液或试剂：香柏油、二甲苯。 （3）菌种：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）及枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）（Stretomyces sp.）（Penicillium）5406放线菌）、弗氏链霉菌。 3.实验步骤 标本片→低倍镜观察→高倍镜观察→油镜观察 ①低倍镜的使用方法（1）取镜和放置（2）对光（3）放置玻片标本（4）调节焦距②高倍镜的使用方法（1）选好目标（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察（防止高倍镜头碰撞玻片），如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。（3）调节焦距③油镜的使用方法（1）在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。（2）将集光器上升到最高位置，光圈开到最大。（3）转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。（