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小吞噬细胞吞噬功能的测定

小吞噬细胞吞噬功能的测定人体外周血中性粒细胞吞噬功能的检测(体外实验)全医2班第三小组小组成员莫 权1413650213曽令楠1413650214蒋远翱1413650215吴 俊1413650216谭 飞1413650217杨志花1413650218Q实验目的掌握中性粒细胞吞噬作用的原理和检测方法掌握显微镜油镜的使用方法掌握瑞特-吉姆萨染色方法实验原理中性粒细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物和异物颗粒。在体外将中性粒细胞与细菌或异物颗粒混合,一段时间后,即可被中性粒细胞吞噬、摄入,制成涂片染色镜检,可以测定中性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。1、菌液:表皮葡萄球菌菌液(/mL)2、抗凝剂:3.8%枸橼酸钠或肝素?实验材料3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、瑞特-吉姆萨染料、pH6.4PB、酒精棉球、采血针等酒精棉球消毒手指后,用采血针从消毒部位采取2大滴血(约0.2mL)加入凹孔中混匀。置瑞特液1min,置pH6.4 PB 中3min,置吉姆萨液染5~10min,蒸馏水洗,待干,然后镜检。将玻片放湿盒内置37℃孵箱30~45min。作用完毕,取出1滴制成薄片。自然干燥。取厚凹玻片一张,在凹孔中滴加1滴(0.4mL)3.8%枸橼酸钠。加表皮葡萄球菌菌液1滴(0.02~0.04mL),然后用牙签轻轻搅匀。416253实验方法结果观察及表示法结果观察:油镜观察中性粒细胞的情况。中性粒细胞细胞质呈淡蓝色,细菌呈深蓝色,红细胞呈褐色,细胞核呈紫色。结果表示法:计数100个中性粒细胞,同时计数吞噬细菌的中性粒细胞数以及被吞噬细菌总数,计算吞噬百分率和吞噬指数。?吞噬百分率00%?吞噬指数注意事项血涂片制作吞噬能力的差异制作血涂片时不宜过厚,否则将影响观察的效果。个体的差异、年龄、健康状况等的不同,其吞噬能力亦不同。

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