机能实验家兔肠缺血再灌注损伤解析.ppt

HAPTER 家兔肠缺血/再灌注损伤 Ischemia-reperfusion Injury in Rabbit (I/R) 组员：张景帧 孙艺 王燕 李蓉蓉 宋天冬 宋子夜 掌握缺血再灌注损伤模型的复制，比较缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别 观察缺血再灌注损伤的表现，理解缺血再灌注损伤发生的机制 【目的要求】 【实验动物】 家兔 【实验器材】 兔手术台、BL-420生物信息采集系统、Y型气管插管、动脉夹、动脉插管、静脉插管、注射器、纱布、棉线、实验动物常用手术器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、25%乌拉坦、生理盐水 【实验设计原理】 通过肠系膜上动脉结扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注，以复制肠缺血/再灌注损伤的动物模型，探讨缺血/再灌注损伤的发生机制 Ⅰ组：持续缺血组 夹闭肠系膜上动脉1h Ⅱ组：再灌损伤组 夹闭肠系膜上动脉30min，再恢复血流30min 【实验分组】 【实验方法与步骤】 1. 称重 2. 全麻（耳缘静脉注射25%乌拉坦4ml/kg） ★注意：从耳缘静脉的远心端开始注射， 排尽气泡，速度不宜太快 ★麻醉效果：角膜反射 基本消失，钳夹家兔 舌头无回收，四肢松软 3. 仰卧固定（背部交叉）、备皮 颈部正中（甲状软骨下缘→胸骨上切迹） 腹部正中（剑突下1.5cm起向下5cm） ★注意：平贴皮肤剪毛，勿拎起皮肤！ 4.颈部正中切口行动脉插管 切口范围：颈部正中，甲状软骨下缘→胸骨上切迹，长约5cm 分离左侧颈总动脉：胸骨舌骨肌与胸锁乳突肌之间深面的颈动脉鞘内，与 气管平行，颜色鲜红、 较细、触之有搏动感， 长约2-3cm，穿线备用 注意：（1）钝性分离 （2）辨清颈A鞘内的血管神经 血管插管 先结扎远心端，后夹闭近心端，剪口部位尽量靠近远心端，成45度角朝向近心端剪一小口，约为管径的1/3-1/2，插管方向朝向近心端，插入1-1.5cm 【插管的注意事项】 插管内事先应加入少量肝素以防凝血；排净气泡，记录前应关闭三通管 插管易滑脱，应双线固定，结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度，避免刺破血管 5.腹部正中切口： 腹正中线自剑突下1.5cm起向下做5cm切口 ※6.寻找肠系膜上动脉： 将家兔腹腔内脏左移，找到齐右肾门对侧垂直向腹主动脉分出的肠系膜上动脉，穿双线备用，注意避免损伤其他血管（缺血再灌注夹闭时注意垫橡皮管） 7.记录一段正常血压曲线 8.复制肠缺血-再灌注模型，轻轻提起肠系膜上动脉的穿线，用动脉夹夹闭，同时观察各项生理指标变化。 9.分组进行实验并记录各项指标。（Ⅰ组：夹闭肠系膜上动脉1h Ⅱ组：夹闭肠系膜上动脉30min，再恢复血流30min） 肠系膜上动脉示意图 1. 移动内脏时，动作要轻柔 2. 分离肠系膜上A时需小心细致，不要使用锐利器械，以免损伤血管造成大出血 3. 肠系膜上A夹闭要彻底，缺血再灌注组结扎时注意垫橡皮管，恢复血流灌流（复流）要完全 【注意事项】 HAPTER