(培养决明生产蒽醌.docVIP

1 引言 1.1 蒽醌介绍 蒽醌类(Anthraquinones)化合物是一类广泛存在于自然界的重要天然色素，在细菌、低等植物的真菌、地衣和高等植物中都有分布。致泻作用是蒽醌类化合物主要的生物活性。例如中药大黄的致泻作用早已被人们熟知。 蒽醌类化合物大多具有一定的抗菌活性，苷元的活性一般比苷类强。如大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等对多种细菌具有抗菌作用。某些蒽醌类成分还具有抗真菌活性。除上述两种生物活性外，有些蒽醌类化合物还具有较广泛的其它方面的生物活性。如对小鼠黑色素瘤、大鼠乳癌及艾氏腹水癌有明显的抑制作用，对cAMP磷酸二酯酶有显著的抑制作用，对异常高的免疫反应有强烈的抑制作用。 1.2 化学性质 蒽醌不易被氧化，能发生硝化、磺化和溴化反应。如果向反应体系中加入HgSO4，则蒽醌磺化几乎都是α-磺酸，继续碘化可得到1.5-及1.8-二磺酸，1，6-、1，7-蒽醌二磺酸是分两步磺化来制备的。例如在蒽醌磺酸中，磺基因受两个羰基的作用，而有一定的活泼性，如磺酸基可被-X、-NH2、-OH等置换。例如β-蒽醌磺酸与NaOH和KNO3共熔，生成1.2-二羟基蒽醌，即茜红素，它是一种红色的植物染料，它可以从茜草根中分离出来，是红色针状结晶，熔点为289℃；它是最早的人工合成的天然染料。 　　分子式：C14H8O2 　 Cossia obtusifoliaL．Cossia tora L．植物形态一年生半灌木状草本，高1～2m。羽状复叶互生；小叶3对，倒卵形或长圆状倒卵形，长1.5～6.5cm，宽0.8～3cm，先端钝，基部圆形，偏斜，幼时两面疏被长柔毛；托叶锥形，早落。花成对腋生；萼片5，分离；花瓣5，黄色，有爪；能育雄蕊7，下面3枚较发达；子房有柄，被白色。荚果线形。种子多数，菱形，淡褐色，有光泽，花期7～9月，果期9～11月。种子棱方形或短圆柱形，两端平行倾斜，长3～7mm，宽2～4mm。表面绿棕色或暗棕色，平滑有光泽。一端较平坦，另端斜尖，背腹面各有1条突起的棱线，棱线两侧各有1条斜向对称而色较浅的线形凹纹。质坚硬，不易破碎。种皮薄，子叶2，黄色。味微苦。1,8-二羟基蒽醌5.5g，精密称定，至于100ml容量瓶中，加新配置的1mol/L的NaOH溶解，定容至刻度，摇匀，量取2，4，6，8，10ml，分别置于25ml容量瓶中，用1mol/L的NaOH稀释至刻度，在分光光度计500nm处测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作标准曲线，回归方程为Y=0.0361X-0.0195，相关系数=0.9984。 3 提取方法 常规方法煎煮与浸渍提取蒽醌类成分效果不好，浪费药材；渗漉与回流提取法需求大量的溶剂且耗时麻烦．为了弥补常规方法中的不足，可采用连续提取法。采用此法之前先要对药材烘烤粉碎，烘烤的目的是可以降低其结合蒽醌的含量，提高游离蒽醌的含量，结合蒽醌主要起通便保肝的作用。粉碎是为了充分提取药物中的蒽醌类。 3.1 实验仪器 索氏提取器（工业器材装置与索氏提取器相似） 3.2 实验溶剂 无水乙醇 3.3 实验原理 索氏提取器共分三部分，上部是冷凝器、中部是带有虹吸管的提取管、下部是烧瓶，操作时将决明子药粉的滤纸袋放入提取管中，内装物高度不得超过虹吸管顶部，烧瓶内加入适量乙醇做挥发性溶剂在水浴上加热。溶剂受热气化，通过中部提取管旁边的蒸气上升管到达上部的冷凝器中，冷凝为液体流入提取管中进行成分提取，待溶剂在提取管中进行成分提取，溶剂在提取管中凝集到一定容量，即当其液面超过虹吸管上端时，则因虹吸作用提取管内全部溶液虹吸流入烧瓶中，流回烧瓶的溶剂可再受热而气化，提取出的蒽醌类成分则留在烧瓶中，如此反复提取，至于植物中蒽醌类成分提尽为止。 连续提取法由于在提取过程中，新鲜溶剂不断地加入而始终保持较高的浓度差，故提取效率高，此法仅需少量溶剂，就能使有效成分提取完全。所以连续提取法可以在工业上很好的提取决明子中蒽醌类。所得提取液进行浓缩，回收溶剂，得到提取物蒽醌类。 3.4 浓缩方法 常压／减压蒸馏法，薄膜浓缩法等，浓缩后可得到主要成分蒽醌类粗品，此方法适合工业推广生产，可节约溶剂和药材，提高药材中的有效成的提取率。 4 纯化 4.1 盐析法 4.1.1 实验原理 在水溶液中加入无机盐饱和时，可使某些溶解度小的物质与溶解度大的物质分离，甚至沉淀析出，然后再对溶液进行溶剂萃取，从而萃取出较纯品蒽醌类。 4.1.2 实验步骤 先把决明子粗提物溶于水中，在加入足量的无机盐使其饱和，使少部分溶解度小的物质先沉淀析出，然后过滤，再用氯仿对滤液进行萃取，萃取后蒸干氯仿，干燥可得较纯的蒽醌类成分．此法的缺点是不能达到很好的纯化效果，且有机溶剂有毒不利于安全生产。 4.2 沉淀法 4.2.1 实验原理 蒽醌类在