答辩--蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素的脱除技术幻灯片.pptVIP

毕业论文蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素脱除工艺的研究  姓名:汤晓娟 专业：生物工程 指导教师：何荣军、蔡成岗 时间:2008.12.10 一.课题研究背景和意义 1.1 课题研究背景： 蜂王浆有增强免疫力、防癌抗癌、抗衰防老、健脑益智、促进生长发育、抗菌消炎、抗辐射、促进组织再生、增强造血功能、调节血压、防止动脉硬化、保护肝脏、催眠、强化性功能以及美容润肤等多方面作用。 其中，尤其值得一提的是在抗衰防老、延年益寿方面的良好作用。但蜂王浆里含有氟喹诺酮类抗生素。 1.2 课题研究的意义： 吸收好 组织浓度高 氟喹诺酮类 抗生素的特点 抗菌谱广 与其他抗菌药物无交叉 耐药性 1.2 课题研究的意义： 氟喹诺酮类残留除了其副作用直接危害人类外, 更严重的问题是食品中残留低浓度的药物可能使人的致病菌产生耐药性, 从而使氟喹诺酮类药物对人类疾病的疗效降低甚至失效,同时使新开发的氟喹诺酮类药品的市场周期大大缩短。 据相关报道所知，我国某些蜂王浆产品抗生素含量有超标现象,从而导致产品频遭退货，严重影响了蜂王浆的出口。因此, 脱除氟喹诺酮类抗生素是非常重要的！ 二.研究内容 分别采用溶剂法、离子交换法和印迹法脱除蜂王浆中氟喹诺酮类抗生素（主要指诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星）； 评价这几种方法对蜂王浆中有效成分（蛋白质和癸稀酸）含量的影响； 3.2 研究方法和手段： 抗生素的脱除的方法：溶剂法、 离子交换法、 印迹法 抗生素测定方法：液相色谱法 有效成分含量的测定：脂肪和癸烯酸 脂肪的测定方法：凯氏定氮法 癸烯酸的测定方法：液相色谱法 3.3.2 抗生素的脱除 溶剂法（乙酸乙酯） 加萃取剂 离子交换法 用阴阳离子交换双柱脱除氟喹诺酮类抗生素 洗脱 印迹法  3.4 氟喹诺酮类抗生素含量的测定 液相色谱法测定氟喹诺酮类抗生素的含量 条件： 色谱柱：Alltech Alltima C18；柱温为室温； 流动相：柠檬酸（0.2 mol/l）∶（甲醇∶乙腈=3∶1）=84∶16； 流速1.0 ml/min； 检测波长：275 nm； 进样量：10 μl。 3.5 蛋白质的检测 凯氏定氮法 消化 整流装置的清洗 蒸馏 滴定 计算： 计算： 式中 X—蜂王浆中蛋白质的含量； v1—滴定试样时0.01 mol/l盐酸标准溶液消耗的体积，单位为毫升（ml）； v0—滴定空白时0.01 mol/l盐酸标准溶液消耗的体积，单位为毫升（ml）； c1—盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mmol/l）； 14.008—氮的毫摩尔质量，单位为克（g）； m—样品的质量，单位为克（g）； 6.25—氮换算为蛋白质的系数。 3.6 癸烯酸的测定 用液相色谱法测癸烯酸的含量 液相色谱条件： 测定波长：210 nm； 柱温度：35℃； 流动相： CH3OH+0.03mol/l+HCl+H2O=55+10+35 流速：1 ml/min； 进样量：10 μl。 结果计算： 式中： X2—蜂王浆中癸稀酸的含量，%； F—校正因子； Ai—试样中被测组分峰面积； As—试样中内标物峰面积； ms—内标物质量，单位为克（g）； mi—试样质量，单位为克（g）。 四 实验结果 4.1 溶剂法 溶剂法中用磷酸盐缓冲液脱除出来的抗生素在液相里检测不出来，原因可能是5 g蜂王浆中的抗生素含量太少了，在液相里面检测不出来，因此初步确定用溶剂法中，在取用5 g样品和本实验条件下，不能对抗生素进行有效检测。 4.2 离子交换法 4.2.1 蜂王浆中蛋白质的含量 阴离子交换法萃取抗生素： 滴定时