考点2：微生物的分离与计数教材分析.docVIP

一、学习目标：说出培养基对微生物的选择作用，并进行微生物的分离和计数。 二、学习导航：自主学习 （一）、分解尿素的细菌的分离与计数 1、分离原理：用__________培养基筛选菌株，即用__________做唯一氮源的培养基。在培养基中加入 指示剂，若指示剂变红，说明该种菌能分解尿素。 2、计数方法：测定微生物数量的常用方法有 和____ 法。 稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的活菌～选择菌落数在30～300的平板进行计数。例1：饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。 （1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有 、 、水、无机盐等基本营养物质。 （2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行　　　　　　　　　，而且须将接种后的培养皿呈　　　　　状态放置。 （3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成 。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数。 （4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A~E五种菌株中， 是产植酸酶的理想菌株。 （5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行 。 变式1-1：莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。莠去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答：由于莠去津的　　　　　作用，在长期使用莠去津的土壤中可能含有目的菌。（2）下图是A～C瓶中三类细菌的最大密度柱形图，由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目是　　　　　　　　　　在固体培养基中，无透明菌落利用的氮源主要是　　　　　　　；有透明带菌落利用的氮源主要是　　，据此可筛选出目的菌。_________________法和_________________法。 四、反馈拓展： 1、从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的是 A.将土壤用无菌水稀释，制备10-3~10-5土壤稀释液 B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上 C.用加入红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌 D.周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株A．活细胞数　　　 B．死细胞数 C．菌落数　 　D．细胞总数 6、随着环境污染的加剧和石油危机的出现，越来越多的国家使用乙醇作为燃料，玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题： (1) 人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在_____ __的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分：C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 (2) 从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制___ ____培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的__ _____。 (3) 经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是__ _____，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生__ _____来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行_______处理(填“消毒”或“灭菌”)。 (4) 产生葡萄糖后需要用到_________ (微生物种类)发酵产生酒精，还可以使用_________检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。 7、(11丰台一模)在调查某湖水中H细菌指数（1升水中含有的菌群数先将5升水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到4个培养皿中培养，培养后的菌落数分别是2、38、5、8。请回答： _ ______ ___。 （2）配制好的培养基用____________法灭菌，并在 条件下接种。 （3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于___ ___中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_