第七章外源性化合物致突变研究报告.pptVIP

X射线损伤修复交叉互补基因（XRCC1）是一种重要的DNA修复蛋白在内外氧剂及烷化剂导致的DNA单链断裂和碱损伤修复中起重要作用，XRCC1能通过自身的不同部位与多种碱基切除修复相关蛋白结合，发生相互作用促进对DNA损伤修复，对维持基因组的稳定起关键作用，并参与顺铂（DDP）或卡铂（CBP）引起的损伤修复过程。 DNA修复能力是与肿瘤易感性和肿瘤化疗敏感性密切相关的双刃剑：DNA修复能力强，肿瘤易感性低，然而在肿瘤治疗过程中，修复能力的增加却阻碍了化疗药物的发挥。多年来，国内外学者对XRCC1的多态性做了相关的研究，主要集中在Argl94Trp和Arg399Gln位点，发现由于XRCC1存在多态性, 不同个体的活性不一样, 从而导致对铂类药物化疗敏感性的不同。 MICRONUCLEUS TEST (三)染色体畸变分析 (四)姐妹染色单体交换试验（SCE） (五)果蝇伴性隐性致死试验 (六)显性致死试验 (七)程序外DNA合成试验 (八)单细胞凝胶电泳 (九)观察方法新进展 三、致突变试验中的一些问题 (一)阴性和阳性对照的设立 1、阴性对照（negative control）它是空白对照，即不加任何处理。或者是溶剂对照。 2、阳性对照（positive control）是用某种已知能产生阳性反应的物质作为对照。其目的是通过对阳性物质的试验证明实验方法的可靠 (二)体外试验的活化系统 S9 S9指经酶诱导剂处理后制备的肝匀浆，再经9000g离心分离所得上清液，加上适当的缓冲液和辅助因子。它主要含有混合功能氧化酶(MFO)。 其缺点是S9随实验动物种属或器官不同而有差异；S9含有的大量亲核物质有可能影响试验的敏感性。 (三)致突变试验与致癌试验的关系 ①已知大多数化学致癌物具有致突变作用，遗传学改变在原癌基因激活和抑癌基因失活上起主要作用，致癌物诱致关键靶基因遗传改变的直接作用等在哺乳动物实验中证实。 ②发现人类接触致癌物与DNA加合物，同其肿瘤中癌基因和抑癌基因的特异碱基对突变之间具有相关性。 ③传统的长期致癌试验，花费大，周期长，不能适应化学物质快速增长的需要。 (四)试验结果在毒理学安全性评价中的作用 阴性结果判定条件： ①最高剂量应包括受试物溶解度许可或灌胃量许可的最大剂量。 ②各剂量组的组间差距不应过大，以防漏检仅在非常狭窄范围内才有突变能力的某些化学毒物。 满足上述条件，仍为阴性，才慎重下结论。 ①阳性结果应具有剂量—反应关系，即随剂量增加，致突变作用增加；和在一组或多组的观察值与阴性对照比较有显著性差异。 ②阳性结论，即表明受试物具有致突变性，而不同致突变试验的遗传学终点不同，其所表示的含义不一。 阳性结果判定条件 思考题 突变的类型有哪些？ 化学物致突变作用的检测遗传学终点有哪些？ 为什么要用成套的实验来检测致突变作用？ Ames实验的原理？常用的菌株？ 微核的来源有哪些？ ppt宝藏__提供下载 * 您可以记录您的观察记录。 您可以在图像区域添加图片或图表。 * 诱发突变 基因突变 染色体 畸变 碱基置换 （错配） 移码突变（缺失、插入） 大段损伤 结构异常 缺失(deletion) 重复(duplication) 倒位(inversion) 易位(translocation) 臂间倒位 臂内倒位 数目异常 非整倍体（aneuploidy） 多倍体 (polyploid) 转换(transition) 颠换(transversion) 第三节 致突变作用机制和后果 一、引起突变的DNA变化 （一）碱基损伤 1.碱基错配 ? 烷化剂(alkylating agent):是指对DNA和蛋白质具有强烈烷化作用的物质 一般情况下甲基化＞乙基化＞高碳烷基化 目前认为最常受到烷化的是 ? 鸟嘌呤的N－7位，其次是O－6位 ? 腺嘌呤的N－1、N－3和N－7也易烷化 ? AP位点（apurinic or apyrimidinic site)：是指丢失碱基的DNA留下了一个无嘌呤或无嘧啶的位点 2.平面大分子嵌入DNA链 嵌入剂（intercalating agent)：指能以静电吸附形式嵌入DNA单链的碱基之间或DNA双螺旋结构的相邻多核苷酸链之间的物质 如丫啶类染料分子多数是多环的平面结构，特别是三环结构，其长度为6.8×10 2 nm，恰好是DNA单链相邻碱基距离的两倍 通常引起移码突变 3.碱基类似物取代 ? 有些化学物的结构与碱基非常相似，称碱基类似物 ? 它们能在S期中可与天然碱基竞争，并取代其位置 例如5－溴脱氧尿嘧啶能取代胸腺嘧啶核苷； 2－氨基嘌呤(2-AP）能取代鸟嘌呤 bromodeoxyuridine Thymin