蛙心灌流實验报告.docVIP

实验二 离体蛙心灌流实验 专业： 学号： 姓名： 实验目的 1.学习离体器官（蛙心）灌流的方法。 2.观察理化因素对蛙心活动的影响。 实验原理 蛙心的灌流:蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。 心肌： 受体 受体激动剂 效应 β1 肾上腺素 去甲肾上腺素 心率增快、房室传导加速、心肌收缩力加强。 M 乙酰胆碱 心率减慢、房室传导减慢、心肌收缩力减弱。 1.任氏液：正常对照 含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4 和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。 2.0.65%NaCl灌流： 3.2%CaCl2灌流： 4.1%KCl灌流： 5.1:10000 E　灌流 6.1:10000 Ach灌流 7.心得安 β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。 8.阿托品 M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。 实验器材 离体蛙心 任氏液、l％KCl溶液、2％CaC12溶液、0.65%NaCl溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品 实验步骤 结果与分析 心率：34次/min 最大收缩力：2.5g 最小收缩力：1.1g 图1 正常脉搏曲线 心率：35次/min 最大收缩力：1.6g 最小收缩力：1.1g 图2 0.65%NaCl灌流脉搏曲线 分析：细胞外液中Ca2+浓度降低，2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。 心率：38次/min 最大收缩力：3.5g 最小收缩力：1.1g 图3 2%CaCl2灌流脉搏曲线 分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发达，储钙能力差，易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外Na+与Ca2+有竞争性抑制，细胞外液Ca2+浓度细胞兴奋时内流Ca2+心肌收缩力 心率：21次/min 最大收缩力：3.4g 最小收缩力：1.1g 图4 1%KCl灌流脉搏曲线 分析： K+与在细胞膜上有竞争性抑制细胞外K+浓度升高，K+抑制细胞膜对转运进入细胞内心肌的兴奋收缩心肌收缩力 心率：35次/min 最大收缩力：3.5g 最小收缩力：0.9g 图5 肾上腺素灌流脉搏曲线 分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合心肌细胞和肌浆网膜通透性肌浆中浓度心肌收缩肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力肌钙蛋白对钙离子的释放肌浆网膜摄取钙离子的速度钠-钙离子的交换复极期向细胞外排出钙离子心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强 心率：34次/min 最大收缩力：2.5g 最小收缩力：1.1g 图6 心得安+E灌流脉搏曲线 分析：心得安是β1受体阻断剂，能够抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用，因此心率及心肌收缩力保持不变。 心率：33次/min 最大收缩力：2.5g 最小收缩力:1.1g 图7 乙酰胆碱灌流脉搏曲线 分析：乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合心肌细胞膜K通道的通透性促K+外流心肌收缩乙酰胆碱可直接抑制通道内流心肌收缩 心率：34次/min 最大收缩力：2.5g 最小收缩力：1.1g 图8 阿托品+Ach灌流脉搏曲线 分析：阿托品是M受体阻断剂，能够抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力，因此心率及心肌收缩力保持不变。 讨论 为何常用离体蛙心，而不常用离体哺乳类动物心脏做心脏灌流实验？ 蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，它的离体组织、器官的生活条件比较简单，易于控制和掌握，来源丰富且价格低廉。离体蛙心不需要恒温和特殊的供氧设备，因此常被选作心脏灌流实验。而哺乳类心脏生活条件要求高，离体心脏灌流需要恒温环境，恒压或恒流灌流、供氧。实验影响因素多、设备多，心脏离体后存活时间较短。因此一般学生实验较少用哺乳类动物心脏做离体心脏灌流实验。 离体蛙心为什么会节律性跳动？ 把离体和脱离神经支配、体液因素影响的动物心脏保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动，这是由于心脏的静脉窦能自动按一定的兴奋节律产生兴奋，并传导到心房和心室，引起整个心脏又节律的兴奋和收缩。静脉窦能产生节律性兴奋是由于其自律细胞在复极完毕后，立即开始自