藤茶提取物及其主要成分二氢杨梅素对大豆油和熟牛肉的抗氧化性预案.docx

藤茶提取物及其主要成分二氢杨梅素对大豆油和熟牛肉的抗氧化性【摘要】分析和比较藤茶的提取物和它的主要成分二氢杨梅素在两个系统中即大豆油和熟牛肉中的氧化活性。大豆油样品的氧化性测定通过使用过氧化值,茴香胺值,顶部空间挥发物和顶部空间的氧含量。使用TBARS(硫代巴比土酸活性物质)测试去测量煮熟的牛肉的氧化性。DHM比BHA能更有效地预防大豆油氧化。EXT在大豆油中的作用并不像BHA或DHM一样有效。在熟的牛肉,这三种抗氧化剂与控制的相比能显著降低氧化程度,但是这三者之间的作用没有区别。EXT和DHM做为天然食品抗氧化剂的机理需要研究具体问题具体分析。1.【前言】脂质氧化是限制许多食品保质期的最重要因素之一。合成的抗氧化剂，如叔丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT），叔丁基氢醌（TBHQ）、没食子酸丙酯（PG），通常添加到食品中去抑制食品的氧化。在最近的几十年中，合成抗氧化剂的安全性问题已经导致了消费者对天然的替代品的兴趣。因此，研究人员正在不断寻找新的天然抗氧化剂。藤茶（族：葡萄科；属：蛇葡萄属）是一种野生植物，生长在中国的华南山区。它干燥过的叶和茎，称为藤茶或茅岩莓，已被作为一种保健茶和草药来消费了数百年。已经有人研究了这种植物的营养概况（陈等人，2007，杨，和熊，2001），毒性（中，周，和陈，2003，2001），和生物活性成分（高等人，2009，田，张，杨，杨，和2002）。二氢杨梅素（DHM），是二氢黄酮醇，也被称为蛇葡萄素，被发现为藤茶中最丰富的生物活性成分（高等人，2009；田等人，2002）。高等人（2009）测量藤茶提取物和DHM的清除DPPH自由基活性，并报道了DHM的清除DPPH自由基活性比TBHQ高得多。在过去的十年中，自由基清除试验，如自由基DPPH，已被用于抗氧化活性的筛选和预测，但这些测定的意义受到质疑（弗兰克尔和迈耶，2000）。为了验证在实际应用中的抗氧化剂的有效性，在脂质底物或食物模型中的的检测是非常必要的。王和同事测试了藤茶提取物在猪油中的抗氧化活性（王、田，熊，和张，2004）。猪油样品处理在200 ppm的粗提物比起200 ppm的TBHQ有明显更低的过氧化值和控制存储。然而，过氧化值只是一个衡量的主要氧化产物得方法。总体氧化水平和抗氧化效果应该基于初级和次级氧化产物的评价（德克尔，华纳，理查兹，夏海迪，2005）。一些抗氧化剂，如维生素E，能通过提供氢增加过氧化物的形成（初级氧化产物）而降低挥发性二次氧化产物的生成。其他化合物，如过渡金属，可以减少过氧化值，同时增加二次氧化产物。在这项工作中，无论是初级还是次级氧化产物进行测定都用于评估抗氧化剂的有效性。在我们的研究中，豆油和牛肉作为测试和比较藤茶提取物（EXT）,DHM和BHA的抗氧化活性的底物。由于它们的的广泛使用并且易氧化，豆油已用作底物来测试处理对氧化的影响和抗氧化剂的功效。过氧化值、顶空挥发物、茴香胺值，以及不同的抗氧化治疗的豆油样品顶空氧含量被用作去估算抗氧化剂的有效性。煮熟的牛肉被用作一个更复杂的矩阵来测试这些抗氧化剂。TBARS试验测定牛肉样品氧化性由于其具有良好的相关感官特性。（费尔南德兹，佩雷斯，阿尔瓦雷斯，洛佩兹费尔南德兹，1995）。2.【原料和研究方法】2.1．藤茶提取物(EXT)的制备从中国张家界三个茶叶店购买相同的藤茶（干叶藤茶茎）。取用10克的茶叶，加入200毫升74%（体积/体积）乙醇水溶液后，在设置为65摄氏度的精密科学360个轨道振动筛（芝加哥，）中提取藤茶提取物。提取液通过孔径为125 大小的过滤袋。使用温度设置为60度的旋转蒸发仪R-3000（弗拉维尔，瑞士）蒸发提取液中的乙醇。残渣冻结并在—50°C的冷冻干燥机中冷冻干燥3天。冻干提取物（EXT）在分析天平称重并存储在—20℃的情况下以便之后的使用。相同的步骤是重复使用去制备三个单独的提取物。2.2．用高效液相色谱分析冻干提取物中DHM含量使用安捷伦1260 无限系列高效液相色谱（里士满，VA）和安捷伦 120 ec-c18柱（5cm x 0.46厘米，2.7微米的颗粒大小）来分析冻干提取物中DHM的含量。流动相A为0.1%（体积/体积）的乙酸水溶液，流动相B为0.1%（体积/体积）在乙腈中的乙酸溶液。流动相由90%的A和10%的B组成，柱子流速为0.5毫升/分钟。该柱在室温下操作。DHM的标准曲线在0、0.25、0.50、0.75、和1mg/ml中的甲醇溶液中绘制。样品在1毫克/毫升甲醇中制备提取。标准/样品注入量为5微升。记录在290nm紫外吸收率和在190nm至400nm的紫外吸收光谱。2.3．总酚含量（TPC）采用在1990年斯潘诺斯和科尔斯塔实验报道过的福林酚法测定总酚。在使用之前，分别配制0，0.1，0.2，0.3，0.