液相色譜-质谱联用(lcms)的原理及应用.docVIP

width: 740px div align=centerfont color=#ff0000 size=3strongnbsp;液相色谱-质谱联用(lc/ms)的原理及应用　/strong/div div align=centernbsp;/div div align=leftbrstrong液相色谱—质谱联用的原理及应用/strong br简介 br1977年，LC/MS开始投放市场/font/div pfont color=#ff0000 size=31978年，LC/MS首次用于生物样品分析/font/p pfont color=#ff0000 size=31989年，LC/MS/MS取得成功/font/p pfont color=#ff0000 size=31991年，API LC/MS用于药物开发/font/p pfont color=#ff0000 size=31997年，LC/MS/MS用于药物动力学高通量筛选/font/p pfont color=#ff0000 size=32002年美国质谱协会统计的药物色谱分析各种不同方法所占的比例。1990年，HPLC高达85%，而2000年下降到15%，相反，LC/MS所占的份额从3%提高到大约80%。我们国家目前在这方面可能相当于美国1990年的水平。为此我们还有很长的一段路要走色谱质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。而且也简化了样品的前处理过程，使样品分析更简便。 br色谱质谱联用包括气相色谱质谱联用(GC-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS)，液质联用与气质联用互为补充，分析不同性质的化合物。 br/font/p pfont color=#ff0000 size=3strong液质联用与气质联用的区别:/strong /font/p pfont color=#ff0000 size=3气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能气化的化合物；用电子轰击方式（EI）得到的谱图，可与标准谱库对比。 br液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定；极性化合物的分析测定；热不稳定化合物的分析测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定；没有商品化的谱库可对比查询，只能自己建库或自己解析谱图。 br/font/p pbrfont color=#ff0000 size=3strong现代有机和生物质谱进展/strong br在20世纪80及90年代，质谱法经历了两次飞跃。在此之前，质谱法通常只能测定分子量500Da以下的小分子化合物。20世纪70年代，出现了场解吸（FD）离子化技术，能够测定分子量高达1500~2000Da的非挥发性化合物，但重复性差。20世纪80年代初发明了快原子质谱法（FAB-MS），能够分析分子量达数千的多肽。 br随着生命科学的发展，欲分析的样品更加复杂，分子量范围也更大，因此，电喷雾离子化质谱法（ESI-MS）和基质辅助激光解吸离子化质谱法（MALDI-MS）应运而生。 br/font/p pfont color=#ff0000 size=3目前的有机质谱和生物质谱仪，除了GC-MS的EI和CI源，离子化方式有大气压电离（API）（包括大气压电喷雾电离ESI、大气压化学电离APCI、大气压光电离APPI）与基质辅助激光解吸电离。前者常采用四极杆或离子阱质量分析器，统称API-MS。后者常用飞行时间作为质量分析器，所构成的仪器称为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS）。API-MS的特点是可以和液相色谱、毛细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括药物代谢、临床和法医学、环境分析、食品检验、组合化学、有机化学的应用等；MALDI-TOF-MS的特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快，操作简单。 br/font/p pfont color=#ff0000 size=3strong质谱原理简介：/strong br质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。 br/font/p pfont color=#ff0000 size=3常见术语: br质荷比: 离子质量(以相对原子量单位计)与它所带电荷(以电子电量为单位计)的比值,写作m/Z. br峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. br离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. br基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度