消毒產品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定液相色谱.docVIP

消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定?液相色谱-串联质谱法 Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride in disinfection product ? LC-MS-MS method 1 范围 本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。 取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。 表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子 中文名称 英文名称 检出限（μg/g） 保留时间（min） 特征离子(m/z) 丙酸氯倍他索 Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4 盐酸左氧氟沙星 Levofloxacin hydrochloride 0.06 1.11 362.0/260.9/318.2 2 规范性引用文件 3 原理 试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。 4.1甲醇：农药残留级。 4.2乙腈：农药残留级。 4.3甲酸：分析纯。 4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。 4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100μg/mL的标准贮备液。准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100μg/mL的标准贮备液。准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0μg/mL的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4?C保存。临用前，再根据需要用甲醇配制成不同浓度的标准使用溶液。 4.6甲酸溶液(0.2%，v/v)：量取2mL甲酸，用纯水定容至1000mL。 4.7 0.45μm滤膜。 5 仪器 5.1 液相色谱-串联质谱联用仪：HP1100高效液相色谱仪(Agilent) - API 4000质谱仪(Applied Biosystems) ，电喷雾离子化源(ESIMS，NI/PI模式)。 5.2 分析天平：感量0.1mg和0.001g。 5.3实验室纯水机：Barnstead纯水机。 5.4涡旋振荡器：Scientific Industries 涡旋振荡器。 5.5 具塞试管：10mL。 6 试样的制备与保存 6.1 试样的制备 取有代表性样品5g，搅拌均匀，制成实验室样品。 6.2 试样保存 制备好的试样置于室温保存。 7 测定步骤 7.1样品前处理 称取0.1g~0.2g样品 (精确到0.001 g) ，置于10mL试管中，加入3.00mL甲醇溶液，涡旋振摇使样品分散后，超声振荡10min。静置，吸取上清液经滤膜（4.7）过滤后，供液相色谱-串联质谱测定。 7.2 测定 7.2.1液相色谱条件 a）色谱柱：Waters Atlantis?dC18，3μm，2.1×150mm； b）柱温：25?C； c）流动相：甲酸溶液（4.6）、水和乙腈，洗脱梯度见表2； d）流速：250μL /min； e）进样量：10μL。 表2 分离丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的洗脱梯度 时间(min) 0.2%甲酸溶液(%) 纯水(%) 乙腈(%) 0 5 45 50 1 5 45 50 3 5 0 95 5 5 0 95 7 5 45 50 11 5 45 50 7.2.2 质谱条件 a）离子化方式：热喷雾电离(TSI)； b）扫描方式：正离子扫描； c）检测方式：多反应监测（MRM）； d）碰撞气(CAD)：7.0 psi； e）气帘气(CUR)：15.0 psi； f）雾化气(GS1)：30.0 psi； g）加热气(GS2)：35.0 psi； h）喷雾电压(IS)：4000V； i）去溶剂温度(TEM)：450?C； j）碰撞室射出电压（CXP）：16V； k）定性离子对、定量离子对、扫描时间、碰撞气能量和去簇电压，见表3。 表3 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的定性离子对、定量离子对、扫描时间、碰撞气能量和去簇电压 化合物 定性离子对 （m/z） 定量离子对（m/z） 扫描时间 Dwell time（ms） 碰撞气能量 CE（eV） 去簇电压DP（V） 丙酸氯倍他索 467.0/355.2 467.0/3