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盐酸 从槐花米中提取芦丁 现代化学实验技术 实验1 从槐花米中提取芦丁 一、目的要求 （1）学习从天然产物中提取黄酮苷的原理和方法。 （2）学习重结晶提纯固体物质的原理和方法。 （3）掌握黄酮苷的纸色谱检验操作。 二、实验原理 芦丁又称芸香苷，广泛存在于植物中，其中槐花米中的含量达12%～16%。芦丁有调节毛细血管壁渗透性的作用，临床用作毛细血管止血药，也作为高血压症的辅助治疗药物。芦丁是糖苷类化合物，常含三分子结晶水，呈淡黄色针状结晶，熔点为174～178?C，无水物的熔点为188?C。芦丁在冷水中的溶解度为1:10000，沸水中为1:200；冷乙醇中为1:650，沸乙醇中为1:60；易溶于碱性水溶液，难溶于酸性水溶液，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿等。 本实验是利用芦丁易溶于碱性水溶液、酸化后又析出的性质进行提取，并利用它在冷水中和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶提纯。芦丁是糖苷类化合物，其糖苷键在酸性条件下可水解产生对应的甙元——槲皮素，所以芦丁的分离鉴定可用纸色谱进行，常用乙酸乙酯:甲酸:水（6:1:3）或正丁醇:冰醋酸:水（4:1:5）作展开剂。 三、主要仪器和试剂 1. 主要试剂 槐花米、石灰乳、浓盐酸、pH试纸、质量分数95%乙醇、展开剂（乙酸乙酯:甲酸:水=6:1:3）、显色剂（质量分数2%三氯化铝）、饱和芦丁标准品乙醇溶液、饱和槲皮素标准品乙醇溶液。 2. 主要仪器 250mL烧杯、500mL烧杯、抽滤瓶、布氏漏斗、滤纸、表面皿、毛细管、铅笔、直尺、色谱滤纸（中速、20cm×7cm）、色谱缸、烘箱、电炉、台平。 四、操作步骤 1. 芦丁的提取 取10g槐花米，置于250mL烧杯中，加入100mL水，煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH=8～9，在此pH下保持微沸20～30min，趁热抽滤，残渣再加50mL水，同上法再煎一次，趁热抽滤。合并滤液，在60～70?C下用浓HCl调至pH=4～5，使沉淀完全，抽滤，沉淀用少量蒸馏水洗涤，抽干，60?C干燥得粗芦丁。 2. 芦丁的精制 用水重结晶：将粗芦丁置500mL烧杯中，加入适量蒸馏水，加热煮沸，趁热抽滤。滤液静置，充分冷却，析出芦丁晶体，抽滤，产品用蒸馏水洗涤，70～80?C烘干，称重，得芦丁产品。 3. 芦丁的纸色谱检验 样品：饱和芦丁自制品乙醇溶液。 对照品：饱和芦丁标准品乙醇溶液和饱和槲皮素标准品乙醇溶液。 支持剂：色谱滤纸（中速，20cm×7cm）。 展开剂：乙酸乙酯:甲酸:水（6:1:3）。 显色剂：质量分数2%三氯化铝喷雾。 1 五、实验结果 1、粗芦丁为土黄色粉末，精制后的芦丁产品为淡黄色粉末。 2、产率： 3、芦丁纸色谱显色中：在色谱中，对照品饱和槲皮素标准品乙醇溶液有明显显色现象，饱和芦丁标准品乙醇溶液显色不明显；样品饱和芦丁自制品乙醇溶液有显色，但其显色最高点和槲皮素显色点高度不一致，最低点显色不明显。 六、分析与讨论 1、芦丁颜色正常，因为粗芦丁中海混有杂质，所以颜色较精制后芦丁深。 2、精制芦丁产率较低，可能是因为：乘热抽滤时溶液温度下降，芦丁析出留在滤纸上；还有部分芦丁未从槐花米中煮出；芦丁转移过程中损失等等。 3、实验所需槐花米粉碎太细，导致抽滤十分缓慢，因而本实验后来用纱布代替滤纸。 4、本来还应有一个粗产率，但因为实验考虑不周全，没有测定粗芦丁质量，所以芦丁粗产率无法计算得到。 5、纸色谱显色：饱和芦丁标准品乙醇溶液所有组都没有显色，可能是制备标准溶液时芦丁浓度太低；槲皮素显色正常，没有问题；样品饱和芦丁自制品乙醇溶液显色不明显，可能是精制芦丁混有杂质。 实验2 分光光度法测定蔬菜总铁量 一、目的要求 （1）学习邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法，掌握分光光度计的使用。 （2）掌握标准曲线的绘制方法。 （3）掌握样品的灰化方法及高温炉的使用。 二、实验原理 在紫外-可见区电磁辐射的作用下，多原子分子的价电子发生跃迁，从而产生分子的吸收光谱。各种物质的分子都有其特征的吸收光谱，以此来获得定性的信息。而在选定波长下测量吸光度A与物质浓度c的关系，可对物质进行定量测定。分光光度法测定的基本原理是依据朗伯-比尔定律，即 A??lgT?lgI0 I?Kcl 式中T为透光率；I0为入射光强度；I为透射光强度；l为吸收池厚度；c为浓度；K为吸光系数。当入射光波长及吸收池厚度一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。 用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度由小到大的标准溶液，在指定条件下依次测量各标准溶液的吸光度，在一定浓度范围内，溶液的吸光度与其浓度呈直线关系。以溶液的浓度c为横坐标、相应的吸光度A为纵坐标，在坐标纸上绘制