第七章细菌的遗传课件.pptVIP

2 转化基因间重组值的计算 转化子数(重组体数) 亲组合数+转化子数 转导： 7.7 细菌同源重组的机制 7.7.2 细菌同源重组的分子基础 ⑵RecA 催化单链同化 RecA:DNA链转移蛋白 功能： ①促进SOS反应中的蛋白酶活性 ②促进DNA的单链与双链DNA分子中的互补链之间 进行碱基配对 条件： ①ATP ②单链DNA RecA可使一条DNA单链置换一条双链DNA分子中同源链的反应称为单链同化 发生条件： ①单链区 ②游离的3’端 ③单链区和游离 的3’端必须位于 这两个分子的互 补区域 ⑶Ruv系统解离Holliday连接点 * 基因间重组频率： 两个位点间的时间约为1分钟，约相当于20%的 重组值。 三、性导（sexduction）: 　　利用F′　因子将供体细胞的基因导入受体，形成部分二倍体的过程称作性导。 　　F 因子整合过程： 　　可逆：发生环出时，F因子 又可重新离开染色体。 Adelberg和Burns(1959)： ?　F 因子偶尔在环出时 不够准确，会携带出 染色体上的一些基因， 这种因子称为F　因子。 ?　F　因子携带染色体 的节段大小：从一个 标准基因到半个细菌 染色体。 　　F′因子使细菌带有某些 突出的特点： ⑴．F　因子转移基因频率极 高，如同F+因子转移频率； ⑵．F　因子自然整合率极高， 并且整合在一定的座位上。 ∵　携带与细菌染色体一样 的同源区段；而正常 F因子 可在不同座位整合。 性导在大肠杆菌遗传研究中的作用： ①．分离出大量F　因子（每个F　因子携带有不同大肠 　　杆菌基因）?　利用不同基因在一起的并发性导的 　　频率来作图； ②．通过性导产生部分二倍体　?　确定等位基因位置、 　　显隐性关系； ③. 性导形成的部分二倍体可用作互补测验?确定两个 　　突变类型是否属于同一个基因。 概念：某些细菌通过其细胞膜摄取周围供体的染色体 　　　片段，将此外源DNA片段通过重组整合到自己 　　　染色体组的过程。 1928年，格里费斯（Griffith F.） 　　在肺炎双球菌中发现转化现象。 1944年，阿委瑞（Avery O. T.） 　　进行肺炎双球菌转化试验； 　　证实遗传物质是DNA； 　　转化是细菌交换基因的方法之一。 7.6 细菌的转化与转导作图 7.6.1、细菌的转化（transformation）： 转化的条件：细菌活跃摄取外源DNA分子； 　　　　　　具备重组程序所必需的酶。 转化三种细菌：肺炎双球菌； 枯草杆菌； 流感嗜血杆菌。 转化的两个例子： ①.　用两个带有不同抗性的肺炎双球菌群体混合　?　可以 　　发现带有双抗性的细菌。 　　细菌裂解　　　DNA残留　　　其它细菌摄取转化。 ②.　枯草杆菌活细胞表面分泌DNA，可被其它细胞摄取。 ㈠、供体与受体的互作： ①.　转化片断的大小： 　　肺炎双球菌转化：DNA片断至少有800bp； 　　枯草杆菌的转化：DNA片断至少有16000bp。 ②.　供体DNA分子存在的数目： 　　供体DNA分子数目与特定基因的成功转化有关。 　　链霉素抗性基因转化：每个细胞含有10个DNA分子之前， 　　　　　　　　　　　　　　抗性转化体数目一直与DNA分子 　　　　　　　　　　　　存在数目成正比。 　　原因：细菌的细胞壁或细胞膜上有固定数量的DNA受体部位， 　　　故一般细菌摄取的DNA分子数10个。 ③．受体的生理状态： 　　感受态是处于刚停止DNA合成、而蛋白质合成继续活跃 进行时的状态。 　　活跃合成的蛋白质可使细菌细胞壁易于接受转化DNA。 　　只有感受态受体细胞才能摄取并转化外源DNA，而这种 感受态也只能发生在细菌生长周期的某一时间范围内。 ㈡、转化DNA的摄取和整合过程： 　①.　结合与穿入： 　　DNA分子结合在细胞表面受体部位上(可逆)， 可被DNA酶降解；受体部位具有饱和性。 　　DNA摄取(不可逆)，不受DNA酶破坏。 　　穿入后，由外切酶或DNA移位酶降解 其中一条链。 　②.　联会： 　　按各个位点与其相应的受体DNA片段 联会。亲缘关系越远，联会越小、转化的 可能性越小。 * ③．整合(重组)： 　　是指单