微生物实验报告.docVIP

实 习 报 告 实习名称 食品微生物检验实习 系 别 生物与化学工程系 年级专业 12级食品科学与工程专业 学生姓名 某某某 指导老师 王老师、黄老师、李老师 X X 学 校 2015 年 1 月 13日 1、实习时间、地点和实习单位 时间 内容 地点 实习单位 12月23—25日 腐乳中细菌含量的检测 3栋1楼 邵阳学院微生物实验室 11月26—28日 腐乳中霉菌含量的检测 3栋1楼 邵阳学院微生物实验室 11月28—1月3日 腐乳中酵母含量的检测 3栋1楼 邵阳学院微生物实验室 11月4—5日 腐乳中大肠菌群的检测 3栋1楼 邵阳学院微生物实验室 2、实习目的 通过食品微生物检验实习，掌握培养基的配制、包扎及灭菌；正确采集样品并对样品进行稀释、滴加、培养；菌落观察、鉴定与计数；数据处理、分析等方面内容，并结合生产和科研技术的发展，开设较高的综合性实验为主，运用综合的实验方、实验手段对我们的知识、能力、素质形成综合的培养。为我们今后从事各种与食品相关的工作打下基础。 3、实习过程概述 3.1参加认识实习动员大会 2014年11月8日上午由黄大川、王瑶琼2位老师召开了微生物实习动员大会。会上，老师们说明了实习目的、内容、时间、地点，着重强调了此次实习的自主性和和注意事项，另外还应遵守实验室的规章制度，保持高度的安全意识。 3.2实习内容 一、腐乳中细菌含量的检测 1、实验材料和设备 1ml移液管 5支,1000ml、500ml、100ml的烧杯各1、1、2个,250ml锥形瓶 3个，100ml量筒1个，研钵1个,滴定管1支,试管5支,试管架1个，玻璃棒1根,培养皿 12个,涂布器1个,洗耳球1个,酒精灯1盏,电磁炉1个，天平1台,药匙1个，pH试纸，标签纸1张，纱布、棉花、线、报纸若干，高压蒸汽灭菌锅，恒温培养箱，超净工作台。 2、牛肉膏蛋白胨培养基的配制 配方：牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g 琼脂15—20g水1000mlpH 7．4—7．6 →溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→倒平皿→接种→培养 3、样品的稀释 ①预处理：在天平上称取25g 样品，置于研钵中，然后加50ml无菌水在无菌室里研磨，磨碎后再加175mL 无菌水于研钵中，最后转至250ml锥形瓶中，充分振摇后，制成1:10 的样液。 ②十倍稀释： 用1mL 灭菌移液管吸取1:10 样液1mL ，沿管壁缓缓注人盛有9 mL无菌水的灭菌试管中（注意吸管不要触及稀释液面），充分振荡试管使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。接着用另一支吸管按上述操作重复，依次制成10倍梯度系列的样品匀液。每稀释1次，换用1支1mL灭菌移液管。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15 min 。 4、倒平皿前准备 开启无菌工作台，先紫外线灭菌，30min后再进入。（研钵用酒精擦拭后，放在无菌室进行紫外灭菌） 5、倒平皿 倒入的培养液要到培养皿高度三分之一的位置，至少倒10个培养皿。倒完培养皿后，将其放在一旁等待冷却凝固。 6、接种 根据对样品污染状况的估计，选择3 个适宜稀释度的样品匀液，根据腐乳的污染情况估计我们选用了10-11、10-12、10-13 三个稀释度，进行10倍稀释时，吸取0.5 mL 样品匀液于无菌培养皿内，每个稀释度做了3个平皿。同时，留1个培养皿作空白对照。（注：每个稀释度做三个培养皿是为了降低误差，使结果更准确，因为我们用的是市售型腐乳，污染情况较严重，所以选用了这三个稀释度） 7、渗透 将接种后的培养皿放置30min，使样液渗入培养基。 8 、倒置培养 将渗透好了的培养基翻过来，放在温度为36±1℃ 的恒温箱中培养 24±1h。 9、实验结果 选取菌落数在30 CFU～300CFU 之间，无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数，低于30 CFU 的平板记录具体菌落数，大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。 稀释度 10-11 10-12 10-13 空白 培养皿1 无法计数 298 31 0 培养皿2 无法计数 264 28 0 培养皿3 无法计数 249 19 0 平均菌落数[CFU/g(mL）] 无法计数 270 16 0 二、腐乳中霉菌含量的检测 1、实验材料和设备 研钵1个，100mL量筒1个，滴定管1支，1 mL移液管6支，试管5支，玻璃棒1根，培养皿12个，500mL烧杯一个，涂布器1个，洗耳球1个，药匙1个，试管架1个，酒精灯1盏，电磁