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微生物学实验讲义 （适用专业：生物工程、生物技术、生物科学） 北 方 民 族 大 学 生物科学与工程学院 2009年8月 实验目录 微生物学实验规则和安全…………………………………………………3 实验一 微生物学实验基本知识及准备、实验室安全教育……………5 实验二 显微镜油浸系物镜的使用及细菌的单染色技术及细菌的革兰氏染色技术…………………………………………………………10 实验三 细菌芽孢、荚膜染色及其识……………………………………17 实验四 显微镜测微技术及细菌运动性观察……………………………19 实验五　酵母菌个体、群体形态观察；血球板显微镜直接计数技术…21 实验六 放线菌个体、群体形态观察……………………………………23 实验七 霉菌个体、群体形态观察………………………………………25 实验八 培养基的配制及湿热灭菌；玻璃器皿的干热灭菌……………27 实验九 从土壤中分离纯化微生物………………………………………30 实验十 理化因素对微生物生长的影响；生长谱法测定微生物营养要求……32 微生物学实验规则和安全 普通微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能，了解微生物学的基本知识，加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验，培养学生观察、思考、提出问题、分析问题和解决问题的能力，实事求是、严肃认真的科学态度以及敢于创新的开拓精神；树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。 微生物学实验室是一个严肃的实验场所，虽然普通微生物学实验所用的微生物材料一般为非致病菌或条件致病菌，但许多微生物是否具有致病性不是绝对的，与其数量、条件、感染途径等有关，所以在实验操作中，必须将所有的微生物培养物都看成是具有潜在致病性的。 为了上好微生物学实验课，并保证安全，特制定如下规则和安全措施： 1．每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。 2．在整个实验过程中必须穿上实验服，留长发者，必须将长发挽在背后。实验台上除了记录本和笔（记录笔和记号笔）以外，不准堆放任何个人物品。 3．认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。 4．实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。 5．实验时小心仔细，全部操作应严格按照操作规程进行，禁止用嘴吸取菌液或试剂，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 6．实验过程中，切勿使乙醇（酒精）、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火器。 7．使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。显微镜的目镜在使用前后必须用浸有乙醇（酒精）的透镜纸擦净。对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放回原处，严禁将药匙交叉使用。 8．每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，将实验室收拾整齐，擦净桌面，如有菌液污染桌面或其他地方时，可用3%来苏尔液或5%石炭酸液覆盖半小时后擦去，如系芽孢杆菌，应适当延长消毒时间。凡带菌之工具（如吸管、玻璃刮棒等）在洗涤前须浸泡在3%来苏尔液中进行消毒。 9．每次实验需进行培养的材料，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养。实验室中的菌种和物品等，未经教师许可，不得携出室外。 10．每次实验的结果，应以实事求是的科学态度填入报告表格中，力求简明准确，认真回答思考题，并及时汇交教师批阅。 11．离开实验室前将手洗净，注意关闭门窗、灯、火、煤气等。 2009年9月1日 实验一 微生物学实验基本知识及准备、实验室安全教育 一、目的要求 1．了解微生物学实验基本概念；认识微生物学实验基本材料 2．熟悉微生物实验所需各种常用器皿的名称和规格 3．学会正确的清洗玻璃器皿的方法和包扎方法；为实验做准备 4．熟读与牢记微生物学实验规则和安全 二、实验原理 为了保证实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净，保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎，试管和三角瓶要做棉塞。清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗净剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同，不同的器皿包扎方法也不