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《植物生理学研究法》
(设计实验方案、实验报告、课程论文)
专业年级 姓 名 学 号 教师 开课一、《植物生理学研究法》实验设计方案(10分)
论文题目 盐胁迫下钙对春小麦的生理效应 小组成员 选
题
依
据
及
实
验
设
计 选题依据:
盐胁迫是限制作物生长发育和产量的主要环境因素之一。据统计,我国约有2.7×107hm2不同程度的盐碱地。并且由于人口增长、工业发展、不合理农业灌溉和施肥等原因, 次生盐碱化土壤面积还在继续扩大,直接造成了可用耕地面积的急剧下降, 严重威胁着我国的粮食安全。在人口不断增多、 耕地面积不断减少的现实压力下, 如何利用大面积的盐碱地发展粮食生产, 是迫切需要解决的重大课题。小麦是我国主要的粮食作物之一, 在保障国家粮食安全方面发挥着巨大的作用。而小麦的抗盐能力相对较弱, 特别是在幼苗期、 拔节- 孕穗期容易引起盐害。严重限制了小麦产量的进一步提高。探讨小麦抗盐机理与调控技术对于提高小麦综合生产能力、 保障我国粮食安全和促进生态环境保护均有重要意义。
盐碱环境是作物生长和产量提高的重要限制因子,主要影响作物的正常生长发育,并且对作物的光合作用有着严重的抑制作用,高盐碱环境也影响作物水分的吸收和细胞膜的通透性。钙是植物必需的一种矿质营养元素,它对维持细胞壁、细胞膜以及膜结合蛋白的稳定性,调节无机离子运输,以及作为细胞内生理生化反应的第二信使偶联外信号,调控多种酶活性等都具有重要的作用。近年来的研究表明,钙能提高植物织或细胞的多种抗性,如抗冷性抗旱性抗热性抗盐性和抗多种矿质元素毒害胁迫等。本文研究了外源钙对盐胁迫下小麦幼苗各相关生理性状的影响,探讨钙与小麦耐盐性机制之间的关系,以期为耐盐小麦品种的选育以及相关课题的研究提供理论依据和技术支持。
实验设计:
种子用0.1 %的HgCl2消毒10min,自来水充分冲洗,然后用蒸馏水浸种24h,播种于盛有石英砂的长方形盘子中,用完全营养液培养。在温室的自然光照下生长,每4d换1次完全营养液。
选取生长一致的三叶一心期的幼苗,转移到 1 L 塑料烧杯(外裹遮光黑布)中,每杯植苗 4 株。每4d换一次完全营养液,待主茎第6叶全展后开始处理分别用:低盐胁迫(150mmol/LNaCl)、低盐胁迫+4mmol/L Ca2+、低盐胁迫+10mmol/L Ca2+、 高盐胁迫(300mmol/LNaCl)、高盐胁迫+4mmol/LCa2+、高盐胁迫+10mmol/LCa2+, 以无NaCl胁迫的小麦为对照。4d换一次营养液,待主茎第6叶全展后开始处理。测量不同条件下处理小麦的抗逆性、SOD活性、POD活性、组织中可溶性蛋白含量、叶绿素含量、脯氨酸含量、丙二醛含量、生物量(鲜重、叶长、根长、干重)。每个指标的测定进行3个重复。
参考文献:
[1]李彩虹,张维军,王毅. 盐胁迫条件下钙对春小麦的生理效应[J]. 宁夏农林科技,2010,(6).
[2]朱晓军,杨劲松,梁永超. 盐胁迫下钙对水稻幼苗光合作用及相关生理特性的影响[J]. 中国农业科学,2004,(10).
[3]陈武,陈珈. 盐胁迫对玉米根尖质膜上受钙激活的蛋白激酶的影响[J]. 植物生理学报,1998,(4).
空白
正常叶片 高盐胁迫 高盐胁迫+钙 低盐胁迫 低盐胁迫+钙 叶片小块
0
15
15
15
15
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15 无离子水(ml)
15
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15 真空抽气时间
抽气10分钟 水分交换时间
水分交换10分钟 测定初电导值
杀死细胞
沸水浴10分钟
测定终电导值 相对电导率 伤害率
注意事项:1、所用的各种处理叶片叶龄要一致
2、整个过程中,叶片接触的用具必须绝对洁净,也不要用手接触叶片
3、抽气要使叶片下沉才能与水分进行充分交换
4、CO2在水中的溶解度较高,测定电导时要防止CO2气源和呼出的CO2进入试管,以免影响结果的准确性
结果计算公式:
相对电导度=初电导值—空白电导值/终电导值—空白电导值
逆境叶片的相对电导度—正常叶片的相对电导度
伤害率(%)=
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