T细胞表位的研究-1.ppt

第三部分 SARS-CoV S蛋白CTL表位残基的初步研究 * 锚定位残基 * * * * * * * * * 第四部分 SARS-CoV S蛋白B细胞表位的研究 * * * 图2 含B细胞表位的多肽组的筛选 Fig.2 Scanning peptide pool which contained potential S protein B cell epitope * 图3 5号多肽组中B细胞表位的筛选 Fig.3 Scanning B cell epitope in pool 5 * 图4 使用Bcipep数据库预测B细胞表位 Fig.4 predict SARS-CoV S protein B cell epitope by Bcipep data * * * 第三章 T细胞表位 Antigen 广州医学院免疫教研室 黄 俊 * 第一部分T细胞表位的基本概念 * * 抗原结合价 Antigenic valence 能与抗体分子结合的抗原表位的总数。 半抗原 —— 单价抗原 完全抗原 —— 多价抗原 表位 Epitope 抗原决定基 Antigenic Determinant 决定抗原特异性的特殊化学基团，是与抗体或抗原受体结合的基本结构单位。 1、抗原表位的概念 * 2、抗原表位的类型 顺序表位（sequential epitope)/线性表位 由连续性线性排列的短肽构成。 构象表位(conformationtial epitope)/非线性表位 短肽或多糖残基在序列上不连续性排列，在空间上形成特定的构象。 T细胞表位与B细胞表位 * * 3、共同抗原表位(common epitope) 不同抗原间含有的相同或相似的表位。 交叉反应(cross-reaction)抗体或致敏淋巴细胞对具有相同或相似表位的不同抗原的反应。 MHC class I peptides of 8-10 amino acids MHC class II peptides of 13 amino acids b2-M a-chain Peptide a-chain b-chain Peptide 4.MHC分子和抗原肽的相互作用 抗原肽和MHC相互作用的分子基础 * 锚定残基（anchor residue） 在抗原肽-MHC分子复合物中，抗原肽的两个或两个以上专司和MHC分子结合的氨基酸残基称为锚定残基。 Y I MHC 分子 Y I MHC 分子 P S A S I K S P S A I K S 共用模体 MHC I 类分子胞外区的结构 抗原肽和HLA相互作用的分子基础 MHC限制性;CD4与CD8表位的差别；人和其他动物的差别 * * T细胞表位的研究方法 1.多肽片段的来源 降解；表达；人工合成 2. MHC分子的结合 直接结合；预测 3. 抗原特异性T细胞的来源 感染或者免疫动物或病人 筛选方法 细胞系的建立 4. 检测指标 活化；增殖；细胞因子；杀伤作用 * T细胞表位的研究意义 1.检测 刺激细胞使用 Tetramer技术 MHC 2. 疫苗 表位疫苗 3. 治疗 * 第二部分 SARS-CoV S蛋白T细胞表位的研究 * 1. SARS-CoV S DNA 疫苗 Zhi-yong Yang (NIH) Nature. 2004, 428 (1 ) 2.免疫方法 8w female BALB/c prime at week 0 50ug DNA boost twice at week 3, 6 2-3w after prime 4-6w after boost 1-2w after boost to observe the effect of prime immunization to observe the effect of boost immunization to observe the effect of long term immunization :mouse sacrificed 50ug DNA i.m i.m 3. 单细胞悬液的准备 淋巴结 脾 肺 剪碎（消化），研磨，200目筛网过滤， 裂解红细胞，2×106/ ml 4. SARS-CoV S蛋白多肽 169条, 17-19aa, 10aa重叠 (NIH NIAID VRC) P1 S1-17 P2 S8-25 P3 S16-22 P168 S1200-1216 P169 S1207-1255 1. S抗原刺激以后IFN-? （图A）和IL-2的产生（图B）