Livin、Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达与肿瘤侵袭转移的相关性.docVIP

Livin、Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达与肿瘤侵袭转移的相关性 　　[摘要] 目的 探讨Livin、Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达与肿瘤侵袭转移的相关性。 方法 选择2000～2010年间各类卵巢组织蜡块65例。以免疫组化法检测Livin以及Beclin1表达，分析组织学分级及临床分期以及淋巴结转移相关性。 结果 恶性肿瘤Livin及Beclin1表达显著强于交界肿瘤，Livin与FIGO分期和淋巴结转移有关，Beclin1与组织分化有关（P0.05）。 结论 Livin在卵巢癌发生和演化及浸润转移中起重要作用，Beclin1在卵巢癌的发生发展中可能起相关作用。 　　[关键词] 上皮性卵巢癌；Livin；Beclin1；免疫组化 　　[中图分类号] R737.31 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）31-0020-03 　　卵巢癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，死亡率居妇科恶性肿瘤之首。肿瘤的侵袭和转移是肿瘤细胞与宿主间质及宿主细胞间复杂、多步骤相互作用的过程， 涉及多种基因及其产物。Livin基因能够抑制细胞凋亡，与多种肿瘤的恶性程度和预后密切相关。Beclin1基因是参与自噬调控的重要基因，可以通过提高细胞自噬活性抑制肿瘤的生长，在人类的许多肿瘤中均存在Beclin1表达的下调或缺失。本研究采用免疫组化方法检测卵巢癌组织中Livin及Beclin1基因蛋白的表达情况，探讨他们和卵巢癌侵袭及淋巴结转移、远处转移等生物学行为之间关系并阐释可能的机制，为有针对性地靶向治疗提供理论依据。现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　选自2000～2010年于我院及吉林大学附属医院行手术切除且通过病理证实[3]后有上皮性肿瘤组织以及正常的卵巢组织所制标本蜡块共计65例。年龄26～72岁，平均年龄 46.3岁，中位年龄49岁。所有病例均为原发性卵巢上皮性肿瘤，术前未做过任何化疗和放疗，术后经病检确诊。其中良性卵巢肿瘤15例（卵巢浆液性囊腺瘤7例，黏液性囊腺瘤8例，以下简称为良性肿瘤），交界性卵巢肿瘤15例（以下简称为交界肿瘤），卵巢癌35例（卵巢浆液性囊腺癌16例，黏液性囊腺癌14例，子宫内膜样癌5例）。卵巢癌临床分期按国际妇产科联盟（FIGO，1985）分期： Ⅰ期7例，Ⅱ期11 例， Ⅲ期13 例， Ⅳ期4 例；按WHO 分化标准：高分化8例，中分化15例，低分化12例；有淋巴结转移13例，无淋巴结转移22例。15例正常卵巢组织来自卵巢活检病例和因子宫肌瘤、功能性子宫出血或子宫脱垂行全子宫切除同时行卵巢切除病例，病理证实卵巢组织无异常。 　　1.2 研究方法 　　全部病患于术前均无放疗和化疗以及免疫治疗。标本由10%的福尔马林溶液进行固定，在48 h内以石蜡包埋，行4 μm连续性切片，而后实施染色。 　　1.3 以免疫组化法对Livin以及Beclin1进行蛋白表达的检测 　　两者蛋白检测均选择免疫组化链霉卵白素-生物素-辣根过氧化物酶复合物法（SP法）[4]于病理科进行。有关流程参考SP9000试剂盒以及DAB显色试剂盒有关说明书进行。用PBS缓冲液替换一抗作为阴性对照，以已知各种抗体阳性型对照片为阳性对照。结果判定标准为：Livin和Beclin1阳性信号可呈现棕黄色的细胞颗粒状，并主要定位于细胞浆中。每例标本应随机选择10个高倍镜型视野，共计数1000个细胞。依照着色强度和阳性细胞的百分率结果实施半定量分析。先为阳性细胞有关着色强度计为0分（即无色）；1分（即淡黄色）；2分（即棕黄色）；3分（即深棕色）。之后为阳性细胞百分率实施评分，1分（即百分率≤10%）；2分（即11%≤百分率≤50%）；3分（即51%≤百分率≤75%）；4分（即百分率75%）。以染色细胞数的分数乘以染色强度得分数计为每份切片的记分数。所得结果中0及1分视为阴性结果；弱阳性（+）是2～3分；中度阳性（++）是4～5分；强阳性（+++）是5分。确保每张切片经2位资深病理工作人员阅片。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS13.0统计学软件分析。数据比较以χ2检验。多组间等级资料以Kruskal-wallis检验；两组间以Mann-Whitney U检验和Spearman法进行等级相关分析[5]。P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Livin和Beclin1在卵巢组织中表达情况 　　在四组中，正常卵巢组织、良性肿瘤、交界肿瘤、卵巢癌组织中Livin表达的阳性率分别为6.7%、33.3%、40.0%、68.6%；Beclin1表达的阳性率分别为93.3%、86.7%、80.0%、37.1%，Livin在卵巢癌组织的表达与正常卵巢组织及良性