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第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 (3)样液测定 吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00mL,置于250mL锥形瓶中,加玻璃珠3粒,从滴定管中加入比预测体积少1mL的样品液,使其在2min内加热至沸。1)数据记录:将试验数据填入下表中。 表格 2)按下式计算乳粉中乳糖的质量分数。 1.仪器及试剂 3.数据记录及处理 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 (1)仪器 分光光度计、50mL比色管、吸量管(1mL、2mL、5mL)。(2)试剂 106g/L亚铁氰化钾溶液、220g/L乙酸锌溶液、饱和硼砂溶液、4g/L对氨基苯磺酸溶液、2g/L盐酸萘乙二胺溶液、5μg/mL亚硝酸钠标准使用液。 2.操作步骤 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 (1)样品处理 称取5.0g乳粉,置于50mL烧杯中,加12.5mL硼砂饱和液,搅拌均匀,以300mL70℃的水将样品洗入500mL容量瓶中,于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温,然后边转动边加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。(2)标准曲线绘制 吸取0.00、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1μg、2μg、3μg、4μg、5μg、7.5μg、10μg亚硝酸钠),分别置于50mL比色管中。 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 (3)试样测定 吸取40mL样品处理液置于50mL比色管中,其余操作同标准曲线的绘制。1)数据记录① 将测定的吸光度填入下表中。 表格 ② 将两次平行测定数据填入下表中。 3.数据记录及处理 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 表格 2)以各标准液中的亚硝酸钠质量为横坐标,测得各标准液的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。3)按下式(4-9)计算乳粉中亚硝酸盐的含量。 1.仪器及试剂 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 (1)仪器 无菌吸量管(25mL、1mL、10mL)、无菌三角瓶(带玻璃珠)、无菌试管、无菌培养皿、旋涡均匀器、恒温培养箱、恒温水浴锅、冰箱、灭菌刀、剪、镊子、架盘药物天平。(2)试剂 改良TJA培养基、改良MC培养基、1g/L美蓝牛乳培养基、65g/L氯化钠肉汤、pH=9.6的葡萄糖肉汤、40%(体积分数)胆汁肉汤、淀粉水解培养基、精氨酸水解培养基、七叶苷培养基、革兰氏染色液、3%(质量分数)过氧化氢溶液、蛋白胨水、靛基质试剂、明胶培养基、硝酸盐培养基、硝酸盐试剂、0.85%(质量分数)灭菌生理盐水。 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 1)以无菌操作将经过充分摇匀的检样25mL(g)放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成1∶10的均匀稀释液。2)用1mL灭菌吸量管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有灭菌生理盐水的试管内(注意吸量管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,使其混合均匀。3)另取1mL灭菌吸量管,按上述操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用1支1mL灭菌吸量管。 2.操作步骤 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 4)选择2~3个以上适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸量管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。5)稀释液移入平皿后,应及时将15mL冷却至50℃的乳酸菌计数培养基(改良TJA或改良MC)注入平皿,并转动平皿使其混合均匀。6)待琼脂凝固后,翻转平板,置于36℃±1℃温箱内培养72h±3h,观察乳酸菌菌落特征(见表4-3),选取菌落数在30~300之间的平板进行计数。1)将各稀释平板上的菌落数填入下表。 3.数据记录及处理 第九节 乳及乳制品的检验技能训练实例 表格 2)根据试验结果及参考第三章第四节、一、6“菌落计数报告”报告检验结果: 第五节 乳及乳制品中硝酸盐的测定 ② 镉柱的装填(如图4-4):用水装满镉柱玻璃管,并装入2cm高的玻璃棉作垫,将玻璃棉压向柱底时,应将其中所包含的空气全部排出,在轻轻敲击下加入海绵状镉至8~10cm高,上面用1cm高的玻璃棉覆盖,上置一贮液漏斗,末端要穿过橡胶塞与镉柱玻璃管紧密连接。如无上述镉柱玻璃管时,可用25mL酸式滴定管代用。③ 镉柱每次使用完毕后,应先以25mL 0.1mol/L盐酸洗涤,再以水洗两次,每次25mL,最后用水覆盖镉柱。2)分光光度计。3)50mL比色管。 第五节 乳及乳制品中硝酸盐的测定 图4-4 镉柱装填1—贮液漏斗(内径35mm,外径37mm) 2—进液毛细管(内径0.4mm,外径6mm)3—橡胶塞 4—镉柱玻璃管(内径12mm,外径16mm)5、7—玻璃棉 6—海绵状镉 8—出液毛细管(内径2mm,外径8mm)
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