实验五植物细胞骨架观察课件.pptVIP

  1. 1、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
油镜的番茄表皮细胞的胞间连丝 实验五 植物细胞骨架显示与观察 问题 1、什么叫细胞骨架? 2、广义的细胞骨架指什么? 3、狭义的细胞骨架又指什么? 4、20-25nm_______;6-7nm___________ 8-11nm______ 一、目的与要求 1、了解植物细胞骨架制片方法和其成分显示的原理 2、掌握考马斯亮蓝R250染色方法 3、观察细胞骨架在细胞中的分布情况 二、原理 细胞骨架指细胞质中纵横交错的纤维网络结构。可分为微管、微丝和中间纤维,它对细胞形态维持、细胞生长、运动、分裂、分化和物质的运输等起着重要的作用。当细胞用适当浓度的Triton-X-100处理时,可将质膜中和细胞内蛋白质溶解,而骨架系统的蛋白质不被破坏,经固定和考马斯亮蓝R250染色后,可使骨架蛋白着色而被显示。 三、材料、器材与试剂 1、材料 新鲜洋葱鳞茎的内表皮 2、器材 滴管、载玻片、盖玻片、镊子、剪刀、10mL小烧杯、显微镜、恒温水浴锅等 3、试剂 1)M-缓冲液 : 咪唑(pH6.7)50mM、MgCl 2 0.5mM、KCl 50mM、EGTA[乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸] 1mM、 巯基乙醇或DTT(二硫苏糖醇)1mM、EDTA 0.1mM 四、实验步骤 1、取材:内表皮约0.5cm2,放在盛有PBS缓冲液的小烧杯中,浸泡处理10min。 2、抽提:吸去PBS缓冲液,取2ml 1%Triton-100入小烧杯中,置于37℃恒温水浴锅中保温30min。 3、冲洗:吸去1%Triton- X-100,用M缓冲液轻洗三次, 每次5min。  五 、实验结果 绘出洋葱鳞叶内表皮细胞内细胞质骨架的分布图。 六、讨论 1.对实验结果的分析 2.实验中的注意事项和关键步骤 七、实验报告与值日 * * 2)磷酸缓冲液(PBS) 3)1%Triton-X-100(用M-缓冲液配制 ) 4)0.2%考马斯亮蓝R250 : 考马斯亮蓝R250 0.2g、甲醇 46.5mL、冰醋酸7.0mL、蒸馏水 46.5mL 5)植物细胞固定液: 5ml 38%甲醛、 5ml冰醋酸、90ml 70%酒精和5ml甘油 4、固定:加植物固定液2ml固定30min 5、冲洗:弃去固定液后,用PBS缓冲液清洗三次,每次1-2min 6、染色:吸去PBS,滴1滴0.2考马斯亮蓝R250染液染色5min 7、制片:倒去染液,用蒸馏水清洗三次,将标本平铺在载玻片上,再盖上盖玻片。 8、观察 *

文档评论(0)

haoshiyi579 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档