微生物的利用教案.ppt

微生物的利用 1、培养基的营养成分 * 微生物所需的营养物质 1、碳源： 能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质 CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、花生饼、石油等 有些碳源还是异养微生物是能源物质 能为微生物提供所需氮元素的营养物质 2、氮源： 分子态氮、氨、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨等 对异养微生物，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源 3、无机盐： 4、水： 注意： 培养基还需要满足微生物生长对PH、特殊营养物质（维生素）及氧气。 提供的主要营养 含量 培养基组分 定容至1000ml 5g 10g 5g 水 NaCl 蛋白胨 牛肉膏 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 碳源、磷酸盐、维生素、氮源 氮源、碳源、维生素 无机盐 氢、氧元素 培养基 2、培养基的类别 按培养基的化学成分 天然培养基 合成培养基 按培养基制成后的形式 （根据物理性质） 液体培养基（用于扩大培养） 固体培养基（分离纯化） 按培养基使用的用途 选择培养基 鉴别培养基 选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 如需要霉菌和酵母菌是，可加入青霉素，抑制细菌、放线菌的生长。 加入高浓度的食盐可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长 鉴别培养基是根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。 如在培养基中加入伊红和美蓝，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。如有大肠杆菌，其代谢产物（有机酸）就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽 微生物培养的无菌技术 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 1、实验室常用的消毒和灭菌方法 灭菌：利用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 消毒：用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。 消毒不一定能达到灭菌的要求，而灭菌则可达到消毒的目的。 2、实验室常用的消毒和灭菌方法 化学药剂消毒 如酒精擦双手 紫外线消毒 煮沸消毒法 巴氏消毒法 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 常见消毒方法： 常见灭菌方法： 大肠杆菌培养和分离纯化的基本操作程序 1、配制培养基 2、灭菌（1Kg，灭菌15min） 3、倒平板（冷却到50℃左右） 注意事项 4、分离 注意事项 5、菌种的保存 冰箱保存 甘油管藏 制备LB培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）（适合细菌生长） 2.调pH：pH6.5-7.5　 3.分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 5.加塞 6.包扎 1.计算、称量、溶化、定容 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 细菌的分离（接种方法） 平板划线法 固体培养基上划线分离 稀释涂布平板法 将菌液稀释10-5--10-7倍→固体培养基上涂布 0.2ml 0.2ml 优点：方法简单 优点：单菌落更易分开 * * *