实验二果蝇的伴性遗传.ppt

实验三 果蝇的伴性遗传与三点测验 厦门大学生命科学学院 实验目的 了解性别决定的原理，正确认识伴性遗传正、反交的差别，进一步认识伴性遗传的特点，记录杂交结果，掌握统计处理方法 掌握三点测验进行基因定位的方法，加深对三点测验原理的理解。 伴性实验图示 实验材料 1．? 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster） 野生型（红眼）X+X+ X+Y 突变型（白眼）XwXw XwY 果蝇都在纯合系统中进行原种保存，实验前重新接种，等幼虫化蛹后，赶走亲本，在一定时间间隔内（8-12h）收集羽化后成虫，分开雌雄，保证雌性个体皆为处女蝇用作今天的实验。 ?2．? 培养基、平皿、毛笔、乙醚、锥形瓶、双筒解剖镜 实验步骤 1．分别收集野生型和突变型处女蝇（为什么？） 2．按A、B组合类型，分别选3-4对相应的雌雄蝇进行杂交培养 3．7-8天后，倒净亲本 4．3-4天后，F1代出现，挑选5对作杂交培养，并观察其性状 5．7-8天后，倒净F1成虫 6．3-4天后，F2代成虫出现。6天后，统一观察并统计。（每一类型的果蝇数不少于7只） 正反交（A、B）分组 纯合P ♀ X+X+ ╳ XwY ♂ ♀ XwXw ╳ X+Y ♂ ?  F1 X+Xw ╳ X+Y XwX+ ╳ XwY ? F2 X+X+ XwX+ X+Y XwY X+Xw XwXw X+Y XwY 结果与分析 （正反交） 思考题 在果蝇中，白眼(white)、樱桃眼(cherry)、朱红眼(vermilion)都是影响眼色的性连锁突变。这三个突变对野生型红眼基因来说都是隐形的。白眼雌蝇与朱红眼雄蝇杂交，产生白眼雄蝇和野生型红眼雌蝇；白眼雌蝇与樱桃眼雄蝇杂交，产生白眼雄蝇和淡樱桃眼雌蝇。根据这些结果，能否判断这三个影响眼色的突变是同一个基因的突变？如果是，是哪个基因突变？ 三点测验的基因定位方法 原理 基因连锁现象中有少部分基因发生交换重组，交换率的高低与基因间的距离成正比，基因图距就是通过重组值的测定而得到的。 三点测验就是利用3对基因的杂合体，进行一次测交而确定3个基因点的位置的方法。 交换率=？重组率 如果基因间距离很近，重组率和交换率的值相等，可以直接根据重组率的大小作为基因间的相对距离，把基因顺序排列在染色体上，绘制出基因图。 如果相距较远，两个基因间往往发生两次以上的交换，这时重组值小于交换值，需要利用实验数据校正，以便正确估计图距。 染色体双交换 实验材料 野生型果蝇（+++）： 红眼，长翅，直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3）: 白眼，小翅，焦刚毛 染色体交换产生八种配子 三点测验杂交组合 思考题 确定正确的基因次序，计算3对基因间的重组值和双交换值，并画出遗传学图。 假定三个基因在常染色体上，试设计三点测交的程序，与本实验比较有何不同？ 为何要以白眼、小翅、焦刚毛的个体为母本？若以它为父本，能否进行三点测验？如果可以，请设计杂交的程序。 果蝇诱变实验设计 物理法 化学法 生物法 物理诱变剂的种类 典型的物理诱变剂是不同种类的射线，常见的有X射线，r射线和中子，此外还有紫外线和β射线。 X射线是种波长为1000－100埃的电离射线，是最早的诱变射线。 r射线是一种波长更短的电离射线，其波长0.1－1埃，60CO和137CS是目前应用最广的r射线源。 中子是不带电粒子，在加速器或核反应堆中得到能量范围极广的中子。252Cf自发裂变中子源可应用诱发突变。 β射线是电子或正电子的射线束，由32P和35S等放射性同位素直接发生的。透过植物组织能力弱，但电离密度大。当同位素溶液进入组织和细胞后作为内照射而产生诱变作用。 诱变机理 X射线和r射线都是能量较高的电磁波，能引起物质的电离。当物体的某些较易受辐射敏感的部位受到射线的撞击时，而发生离子化，可以引起DNA链断裂，当修复时不能恢复到原状就会出现突变。如果射线击中染色体则可能导致断裂，在修复时可能造成缺失、重复、倒位和易位等染色体畸变。中子不带电，但当与生物体内的原子核撞击后，使原子核变换产生r射线等能量交换，从而影响DNA和染色体的改变。 诱变方法 一般采用r圃，以60CO源为中心种植多种处理材料，并按材料材料与60CO源中心距离和照射时间来控制照射剂量。这种r圃对于诱变育种的应用不是十分合适的，但作为植物对辐照的效应以及辐射生物学等理论研究是十分有意义的。一般设设置较小的60CO室进