41酶的特异性(阅读).pptVIP

实验四 影响酶活性的因素 一、实验目的 观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。 二、原理 影响酶活性的因素包括：底物类型、酶浓度、底物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、pH值、温度等 淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖，这种降解过程是逐步进行的，降解的中间产物遇碘曾现不同的颜色： 淀粉 → 红色糊精→ 无色糊精 → 麦芽糖 → 葡萄糖 （紫蓝色）（红色） （无色） 所以根据水解液和碘反应的颜色，可以判断水解是否已完全。 三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液、 5％氯化钠溶液、0.1％硫酸铜溶液、 0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、KI-I2溶液 2. 器材 恒温水浴锅、冰箱、电磁炉 四、操作方法 1. 唾液淀粉酶液的准备：实验者先用蒸馏水嗽口，然后含一口蒸馏水于口中，轻嗽一、二分钟，吐入小烧杯中。将其稀释5-20倍。 2. 淀粉酶活性的检测： 取一支试管，注入0.5%淀粉溶液3 mL与稀释的唾液1 mL。混匀后插入1支玻棒，将试管连同玻棒置于37℃水浴中。不时地用玻棒从试管中取出1滴溶液，滴加在白磁板上，随即加1滴碘液，观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中，遇碘后溶液颜色的变化及反应时间。 根据反应时间调整酶的稀释倍数。 实验四－1 酶的特异性 一、实验目的 了解酶的特异性并掌握检查酶的特异性的方法和原理。 二、原理 酶的特异性是指一种酶只能对一种或一类化合物（此类化合物通常具有相同的化学键）起作用，而不能对别的化合物起作用。如淀粉酶只能催化淀粉水解，对蔗糖的水解无催化作用。 本实验以唾液淀粉酶（含淀粉酶和少量麦芽糖酶）对淀粉的作用为例，说明酶的特异性。淀粉和蔗糖都没有还原性，但淀粉水解产物为葡萄糖，蔗糖水解产物为果糖和葡萄糖，均为还原性糖，能与Benedict试剂反应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。 三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液 2. 器材 恒温水浴锅 四、操作方法 1. 检查试剂 取2只试管，按下表操作。 五、注意事项 唾液的稀释倍数因人而异，有时差别很大，稀释倍数可以是5～100倍。 六、思考题 1、 为什么要做试剂检查实验？省略该步骤可能有怎样的结果？ 2、 酶作用的专一性有哪几种？ * * 沸水浴煮沸2～3min 2 2 Benedict试剂/mL 记录观察结果 3 — 2%蔗糖溶液/mL － 3 0.3％NaCl 的0.5%淀粉溶液/mL 2 1 试管 编号 试剂处理 淀粉酶的专一性实验 取2只试管，按下表操作。 摇匀，置37℃水浴保温10min 1 1 稀释的唾液/mL 沸水浴煮沸2～3min 2 2 Benedict试剂/mL 记录观察结果 3 — 2% 蔗糖溶液/mL － 3 0.3％NaCl的 0.5%淀粉溶液/mL 2 1 试管编号 试剂处理