乙肝血清标志物检测.ppt

2 2 2 性传播 肠道外传播（血液传播） 母婴垂直传播 - Mothers who are HBeAg positive are much more likely to transmit to their offspring than those who are not. Perinatal transmission is the main means of transmission in high prevalence populations ELISA是将抗原或抗体吸附到固相载体上作为一种试剂来检测标本中有无相应的抗体或抗原的一种分析方法。 发光免疫分析：利用生物发光、化学发光或荧光标记来检测抗原抗体的分析方法。 反向间接血凝试验：用抗-HBs吸附于羊红细胞制成致敏红细胞，与标本中HBsAg结合时出现红细胞凝集。 30 HBsAg先阳性后消失；抗HBc IgM阳性且高效价；先HBeAg阳性，随后抗Hbe阳性；恢复期出现抗HBs HBV DNA先阳性后消失 31 HBsAg持续阳性；抗HBcIgM低效价或者阴性；抗HBc总抗体阳性；HBeAg/抗Hbe阳性；抗HBs通常阴性 HBV DNA持续存在、效价高或低 病原学诊断(一)--抗原抗体检测 项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) 发光免疫分析(定量) 反相间接血凝试验(少用) ELISA的基本原理 利用抗原和抗体特异性结合 主要的试剂 固相抗原或抗体 酶标记的抗原或抗体 酶的底物 ELISA的主要方法 间接法: 测定抗-HBs 夹心法：测定HBsAg和HBeAg 竞争法：测定抗-HBc 中和法：测定抗-HBe 捕捉法：测定抗-HBc IgM 病原学诊断(二)—核酸检测 核酸杂交 探针 PCR 引物 各项HBV血清标志物的解释 HBsAg –HBV感染的标志,可能是急性或慢性 Anti-HBs – 既往感染自然免疫/接种疫苗产生 Anti-HBc IgM – 急性HBV感染标志 Anti-HBc IgG – 既往或慢性HBV感染 HBeAg – 病毒复制活跃，具有高度传染性 Anti-HBe –慢性感染,病毒不再复制,低传染性 HBV-DNA – 直接测定病毒复制状态，比HBeAg更准确；临床主要用于监测治疗反应 为什么要开展乙肝“两对半”定量检测 乙型病毒性肝炎是世界性的传染病，严重地威胁着人类的健康。我国是乙型病毒性肝炎高发病国家。据统计全世界无症状携带者（HBsAg携带者）超过2.8亿，我国占1亿以上，且多数无症状。所以乙肝的早期诊断对控制传染源、降低发病率及疾病的治疗均具有很重要的意义。酶标（ELISA）检测始于20世纪80年代中期，它对乙肝“两对半”定性测定在疾病的诊断，病情监测，疗效观察起到了一定的作用，但酶标检测HbsAg灵敏度较低，不能真正意义上定量测定血清中HbsAg含量。随着临床医学的发展，定性检测已经远远不能满足临床及患者的要求。化学发光免疫分析定量测定乙肝“两对半”大大弥补了酶标定性测定及灵敏度低的不足。 血清学检测的临床意义 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义 急性或慢性感染(大三阳) + - + - + + + + 乙肝后期或慢性感染(小三阳) - - + + - - - 潜伏期或急性乙肝早期 - - + + + 痊愈或恢复期,有免疫力 - - - - - + + + - - 痊愈,有免疫力 疫苗接种或曾经感染过,有免疫力 血清学检测的临床意义 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义 血清学检测的临床意义 血清学检测的临床意义 急性或慢性感染(传染性弱) + - - - + - + + 急性乙肝恢复期或既往感染 - - - - - - + 急性窗口期或既往感染康复期 - - - - - 未感染过 HBV + + - - + + + - - + 急性感染趋向恢复;慢性携带者 HBV感染已恢复,有免疫力 Symptoms HBeAg anti-HBe Total anti-HBc IgM anti-HBc anti-HBs HBsAg 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100 Acute HBV Infection with Recovery Typical Serologic Course Weeks after Exposure Titre IgM anti-HBc Total anti-HBc HBsAg Acute (6 months) HBeAg