高中生物选修3蛋白质工程的崛起解决方案.ppt

植物体细胞杂交过程示意图 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 4、单克隆抗体的应用 * * * * * 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 2002年１２月３０日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。 STS “太空婚礼” “太空婚礼”科研项目一： “太空婚礼”科研项目二： 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 物理法的融合效率较高,且对细胞（原生质体）的伤害小,易操作、控制和观察。 太空中处于失重状态，不同种细胞（原生质体）更容易亲近； 为什么在太空中细胞（原生质体）融合率会大大上升？为什么选用物理法诱导？ 阅读课本P52动物细胞融合内容 问题：什么是动物细胞融合？它相当 于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？ 一、动物细胞融合的概念 一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、过程： 动物细胞A 动物细胞B 灭活病毒诱导 有丝分裂 （膜融合、质融合、核融合） 杂交细胞 2个完整的杂交细胞AB （筛选） 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 灭活丧失感染性 保留融合活性 细胞核 病毒颗粒 细胞核 5、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇（PEG) 生物法:灭活的病毒 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 二、单克隆抗体 传统的抗体生产办法及缺陷是什么？ 抗体由什么细胞产生？ 效应B淋巴细胞（浆细胞） 抗体的传统生产方法 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种效应B细胞 动物体内 多种抗体 抗原 　　抗体 每个效应B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体 思考与探究： 如何获得大量化学性质单一、特异性强的抗体？ 提示： 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 1.单克隆抗体的概念 提示1：对效应B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题：如何大量生产单克隆抗体？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 2.制备单克隆抗体 注射抗原 效应B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 选择性培养基 筛选1 专一抗体检测 克隆化培养 单克隆抗体 筛选2 1.注射抗原的目的是什么？ 培养骨髓瘤细胞 2.诱导细胞融合的手段有哪些？ 3.若细胞两两融合后，有几种融合情况？ 4.第一次筛选出的杂交瘤细胞为何需进行克隆化培养和专一抗体检测？ 特异性强、纯度高、灵敏度高， 产量大、容易标准化生产。 3、单克隆抗体的优点 １、可用于作为诊断试剂： 有准确，高效，简易、快速的优点 ２、可用于疾病治疗 　　　　　主要用于癌症治疗 ３、可用于运载药物 （作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹”。） （“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物）治疗癌症 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3