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血清葡萄糖参考方法-附录1
附 录 1 试 剂 试剂名称 配制溶液的浓度 配 制 方 法 贮 存 保质期 硫酸锌(皓矾) 22g/L 准确称取22g ZnSO4.7H2O,放入烧杯内,用800ml热的无CO2水溶解后转移至1000ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭玻璃瓶室温保存 1个月 氢氧化钡 饱和溶液 准确称取80g Ba OH 2.8H2O,放入烧杯内,用800ml热的无CO2水溶解后转移至1000ml容量瓶内,补足至刻度线。 带有碱石灰帽的玻璃瓶密闭室温保存 1个月 氢氧化钡 0.11N 用无CO2水稀释245ml饱和Ba OH 2溶液→1000ml。 密闭玻璃瓶室温保存 1天 安息香酸 1g/L 准确称取2.0g安息香酸,放入烧杯内,用1800ml热的试剂水溶解后转移至2000ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 3个月 Tris-Hcl 1.5% 准确称取31.52g Tris-Hcl,放入烧杯内,用1800ml试剂水溶解后转移至2000ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 Tris-Base 1.2% 准确称取6.06g Tris-Base,放入烧杯内,用400ml试剂水溶解后转移至500ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 醋酸镁 pH7.5 移取800ml Tris-Hcl原液和200ml Tris-Base原液至烧杯内充分混匀。准确称取1.1g 醋酸镁溶解于混合好的Tris溶液中,在25℃测定混合液pH值。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 牛血清白蛋白 0.2% 准确称取0.5g 牛血清白蛋白,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 5三磷酸腺嘌呤二钠盐 准确称取0.8268g ATP二钠盐,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐 准确称取0.9952gβ-NAD+,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 己糖激酶 己糖激酶原液酶总活性应为1250U 采用25℃称量法依据己糖激酶测定的含量获得总活性为1250U己糖激酶,放入烧杯内,用200mlTris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,用Tris-Mg缓冲液补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 6 -磷酸葡萄糖脱氢酶原液总活性应为1250U 采用25℃称量法依据6-磷酸葡萄糖脱氢酶测定的含量获得总活性为1250U 6-磷酸葡萄糖脱氢酶,放入烧杯内,用200Tris-Mg缓冲液溶解后转移至250ml容量瓶内,用Tris-Mg缓冲液补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 酶试剂 试剂验证合格后,用Tris-Mg缓冲液稀释200mlATP原液、200mlβ-NAD+原液、总活性800U的己糖激酶原液和总活性800U的6-磷酸葡萄糖脱氢酶原液→1000ml,轻轻颠倒混匀,不要用力振荡。 密闭试剂瓶2-8℃ 2周 葡萄糖标准原液 10g/L 准确称取5.000g SRM917b标准物质,放入清洁干燥经过灭菌处理的烧杯内,加入300安息香酸稀释液进行溶解,溶解后转移至500ml class A级容量瓶中,用安息香酸稀释液多次冲洗烧杯,将烧杯内的葡萄糖溶液全部转移至容量瓶,加安息香酸溶液至500ml标记线下1cm处,把容量瓶放20℃±1℃水槽中,水没至瓶颈处,密闭,用安息香酸稀释液补足前平衡溶液30分钟。30分钟后安息香酸稀释液补足,塞紧颠倒混匀至少10次,每一次颠倒、旋转倒置容量瓶10秒。 密闭试剂瓶2-8℃ 葡萄糖液 60% 用1g/L安息香酸稀释60ml葡萄糖原液→100ml 密闭试剂瓶2-8℃ 1周 酚酞 0.5% 准确称取0.125g酚酞溶解于20ml 95%乙醇中,转移至25ml容量瓶内,用95%乙醇补足至刻度线。 密闭试剂瓶2-8℃ 3个月 试剂水 ISO 3696定义的3级以上试验用水 无CO2水 试剂水在敞口的容器中煮沸15分钟,盖盖住冷却,直到使用前 乙醇 95% 质控物 从低温冰柜取出的质控品应放置室温10分钟,并擦去瓶上的水分。垂直固定质控品瓶,轻弹使冻干粉落入瓶底。天平称重。打开瓶盖,轻轻地移去胶塞。用检定过的(见下面的注释)稀释配液仪沿管壁缓慢精确加入去离子水至复溶量。天平再次称重,保留称重记录。溶10分钟后,轻轻颠倒20-30次充分混匀各成分。 仪 器 名 称 安装/使用条件 数据测定范围 测定模式 技术指标 校准情况 紫外可见分光光度计 温度:(
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