3.2-体外受精和早期胚胎培养解析.ppt

1.受精作用的概念、场所、标志、包括哪几个阶段？ 2.受精阶段包括哪几个步骤？发生了哪些重要的生理反应？ 3.胚胎发育的过程是什么?桑椹胚、囊胚、原肠胚各有什么特点? 复习回顾 试管婴儿 1978年7月26日，世界首例试管婴儿“路易斯．布朗”在英国诞生，现已成为母亲。 转基因试管牛 我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生 一、试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。 快速繁殖动物优良品种 目的： 技术手段： 体外受精和早期胚胎培养 主要包括 、 和 等几个主要步骤 。 二、体外受精 卵细胞的采集 精子的获取 受精 1.卵母细胞的采集和培养 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集： 最常用的方法是给供体注射 ，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 （超数排卵） 促性腺激素 输卵管 注射？ 因为促性腺激素为肽类化合物，饲喂会因消化道的消化作用而失去原有的效用。 大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。。 卵巢 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 采集的卵母细胞,都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精 活体采集的牛卵母细胞 2.精子的采集和获能 收集精子的方法有： 假阴道法（常用） 手握法 电刺激法 在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。 对于 、 和 的精子，一般采用培养法；对于 、 等家畜的精子常用化学法。 培养法：精子在获能液中获能。 化学诱导法：精子在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。 培养法 化学诱导法 啮齿动物 家兔 猪 牛 羊 3.受精 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或 中完成受精过程。 获能溶液 专用的受精溶液 MⅡ中期 三、胚胎的早期培养 发育培养液成分：无机盐、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、水、血清等 目的： 检查受精状况和受精卵的发育能力 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿：8--16个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 保存剩余的卵子和精子的方法是什么？ 讨论：1、试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕，生产过程的相同之处是： 通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿 不同之处是： 试管婴儿技术受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植 2、试管动物与克隆动物的区别 试管动物 克隆动物 生殖方式 技术手段 遗传规律 有性生殖 无性生殖 动物细胞核移植技术 试管动物技术 遵循 不遵循 试管苗 无性生殖 植物组织培养 不遵循 试管动物技术 体外受精 早期胚胎培养 卵母细胞的采集 精子的获取 受精： 条件： 培养液成分： 假阴道法 手握法 电刺激法 方法一：用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵 管中冲取卵子 方法二：从屠宰母畜卵巢中采集 方法三：直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 受精卵在发育培养液中培养 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、水、血清等 获能的精子 ＋培养成熟的卵子 完成受精 课内小结 * * * * * * * *