毛细管电泳技术在中药成分分离中的应用进展试卷.doc

毛细管电泳技术在中药成分分离分析中的应用进展 摘要：介绍了毛细管电泳的原理，分离模式，以及它在中药成分分离分析中的研究动态和优势。 关键词：毛细管电泳；中药成分；应用进展 Research Progress of Separation Analysis of Capillary Electrophoresis on the Chinese Herbal Constituents in Traditional Chinese Medicine Abstract：This paper introduces the principle of capillary electrophoresis ，separation mode as well as its analysis of Chinese medicines dynamic and advantages. Key words：Capillary electrophoresis；chinese herbal constituents；research progress 高效毛细管电泳（HPCE，High performance capillary electrophresis)又称毛细管电泳（CE)，是上世纪80年代后期在分析化学，尤其是生物分析化学领域得到迅速发展的一种分离分析手段。因其高效、高速、高灵敏度、高自动化以及样品和试剂耗用量少等特点， 被广泛应用于药物的研究和分析中。 1毛细管电泳技术 电泳即带电粒子在电解质中，在电场作用下以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象，粒子在单位电场下的电泳速度称为淌度。淌度与粒子所带电荷数及体积大小相关，因此不同的粒子由于淌度不同从而实现电泳分离。但是传统电泳技术无法克服高压产生的焦耳热现象，从而限制了高压的使用，无法提高分离速度和分离效率。毛细管电泳则采用毛细管作为分离通道，毛细管的表面积/体积比大，因而散热快，可以承受高电场(100-1000V/cm)。 1.1分离原理 毛细管电泳是一类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术，其基本结构包括进样系统、毛细管、检侧系统、高压电源、清洗机构、温控系统等。它的原理是以高压电场为驱动力，以毛细管作为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。 CE中的进样方式有流体力学进样、电动进样和柱内样品富集进样。流体力学进样是通过在毛细管的入口端施加压力、在出口端抽真空或抬高入口端(虹吸现象)使毛细管的入口端和出口端的压力不同来进样；电动进样时所用电压一般为5-10kV，进样电压通常要比分离电压低3-5倍；柱内样品富集是指样品在分离之前先进行浓缩以达到提高检测灵敏度的目的。 1.2分离模式 HPCE结合经典电泳与色谱技术的工作原理和特点，发展出了多种分离模式，这些分离模式的原理和特点见表1[1]。 表1毛细管电泳的主要分离模式 类 型 原 理 应用特点 毛细管区带电泳（CZE） 基于溶质的电泳淌度不同 分离离子化合物，样品分子大 毛细管胶束电动色谱（MECC) 基于溶质胶束相和水相的不同分配 分离离子及中性化合物，样品分子量小于 5000 毛细管电色谱（CEC） 基于溶质与固定相相互作用的不同 CE 与 HPLC 的结合 毛细管等速电泳（CITP） 基于溶质的电泳淌度不同 用于预浓缩 毛细管等电聚焦（CIEF） 基于物质的等电点不同 测定蛋白质的等电点、分离异构体 毛细管凝胶电泳（CGE） 凝胶起“分子筛”作用，基于溶质分子大小不同 用于蛋白质，寡聚核苷酸等大分子的分离 2 EC在中药活性成分分离分析中的应用 中药中含有的有效活性成分有其特殊复杂性，首先是中药品种繁多，不同品种含有的活性成分含量差异大；其次，中药中有效成分还受产地、栽培方式、生长环境及采收季节和环境等多种因素影响。HPCE具有高效、快速、溶剂消耗小、进样体积小等特点，能够同时分离分析中药所含的多种成分，提高分析效率，解决中药分析中遇到的基体复杂的问题，因此在中药活性成分分离分析方面发挥出了独特的优势[2，3]，在黄酮类、生物碱类、醌类、有机酸类、三萜类、苷类、多糖类和香豆素类等多种天然化学成分的分离分析中被广泛应用。 2.1黄酮类 黄酮类化合物广泛分布于植物界， 并具有较强的生物活性， 例如抗菌作用、抑制癌细胞的生长或抗癌作用、解痉挛作用和降低血压作用等[4]。黄酮类化合物不但在医药上有着广泛的应用而且在日常生活当中可作为功能食品添加剂、天然氧化剂、天然色素和甜味剂等。由于黄酮类化合物重要的药用价值和保健作用， 对于复杂天然产物中的黄酮类化合物进行分离分析对其进一步的研究工作起着指导作用， 同时对于其应用和产品开发也具有重要的意义[