D3胚胎程序化冷冻1.docVIP

D3胚胎程序化冷冻 操作步骤 冷冻卡片，冷冻协议书的书写与核对。 要求与病历信息完全一致，包括病人双方姓名，冷冻日期，病历号，冷冻号，受精方式，冻存冻胚数量及管数。要求两人核对，核对无误实验室人员签字。 冷冻麦管头及冷冻存放位置的标记。 要求于麦管头上正确清晰书写女方姓名，男方姓氏，本麦管冷冻胚胎数，并在麦管顶端标记，将麦管颜色及顶端标记记录于冷冻卡片相应位置。根据每位病人所需冷冻麦管数确定冷冻麦管存放位置并记录于冷冻卡片相应位置。冷冻前核对。 冷冻前冷冻液及耗材准备。 冷冻前20分钟以上安装程序冷冻仪，开始准备程序，开启加热泵。 冷冻前20分钟以上配置冷冻液F1，F2，F3加20%HSA，混匀。F1，F2按0.3ml/人份，F3按0.3ml/管配置，并将配好的冷冻液置于37℃温箱预热。 按一个60mm圆皿或四孔/人份，一根巴斯特吸管/人，一根移液管，准备耗材。 冷冻及胚胎形态记录。 胚胎分别至于冷冻液F1，F2，F3并按5分钟，15分钟，15分钟计时操作。记录每个冻存胚胎形态分级，并在F3中按冷冻卡片所示将麦管内加入正确的胚胎数，插入相应麦管头。 程序降温及麦管收集储存。 将装好的麦管按3根麦管/孔放入冷冻仪中，标记存放位置，开始冷冻程序。冷冻仪中冷冻程序起始温度为20℃，以-3.0℃/min的速度降温至-7℃，Soak5-6min。手动Seeding，Seeing温度：-7℃。Seeding后以-0.3℃/min的速度降温至-30℃，再以-30℃/min的速度降温至-150℃。程序结束后收集麦管于液氮中并按卡片位置永久存放。核对无误，记录本登记，卡片收入冷冻库卡片库。 D3胚胎冷冻标准： 4CG2及以上。如冻存的胚胎全部为4～5细胞，则注明D2 FET。 0PN或1PN胚胎原则上要与2PN来源胚胎分别冻存。 RT胚胎与ICSI 胚胎原则上要分别冻存。 如果患者从未ET, 在冷冻卡片上记录女方年龄，以提示首次移植时选择胚胎移植数目。 夫妇双方如有乙肝（大三阳，小三阳）要标注于冷冻卡片上，存放时注意放入相应储存罐，梅毒患者冻存标准见下表。 其他注意事项，如患者有单角子宫、双胎晚期流产史、FET后PGD等，均在卡片上注明。解冻时注意相应胚胎选择。 梅毒患者胚胎冻存标准 RPR TPPA 意 义 策略 1． （+） － 1）梅毒潜伏期 2）假阳性 1）单独存放 2）复查 2． － （+） 既往梅毒，有正规驱梅治疗史，治疗后TPPA应转阳 正常人对待 3． （+） （+） 1）梅毒进行期（不应进入IVF） 2）RPR持续弱阳性，TPPA高，说明治愈后，抗体反应不理想 1）不冷冻 2）按照1对待，单独存放