第十节纸层析和薄层层析法.ppt

第七章色谱分析法 一、纸层析和薄层层析分离过程 二、操作技术 三、特点及应用 一、纸层析和薄层层析分离过程 二、操作技术 2.展开剂 3. 点样 4.显色、检测 三、特点及应用 缺点: * * 第十节纸层析和薄层层析法 纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源。 纸层析和薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。 将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过试样点时，带动试样向上运动。 1.层析纸和层析板 特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形（或筒型）。层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝，200～250目）均匀地涂在长条形玻璃板上（厚度0.15～0.5mm）。干燥后即可使用。 由一种或多种溶剂按一定比例组成。如用纸层析分离氨基酸时，常用的展开剂组成和配比为：正丁醇：乙酸：水 4：1：1。 用微量注射器或玻璃毛细管吸取一定量试样点在原点上。试样点的直径一般应小于5mm。可并排点多个试样同时展开。 有些组份在紫外光照射下产生荧光，可在紫外灯下用铅笔将组份斑点描绘出来。常用的显色方法有喷洒显色剂、碘蒸气熏或氨水熏等。 平板色谱简单、方便、及操作费用低， 可以在一块层析板上同时展开多个试样及将多条滤纸同时展开。 采用方形薄层板还可以方便的进行二维展开，即按一般方法展开后，改变方向和展开剂再次展开，进一步改善分离效果。 试样一般不需要经过预处理即可分离。 缺点： 分离效率较低，不适用挥发性试样分离。定性定量不便。 应用：平板色谱法在染料、农药、医药、有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基酸、蛋白质及中草药中有效成分的分离分析中经常被使用。也可以用于无机离子的分离。还经常作为高效液相色谱的一种预试方法。 请进入下一节： 第一节 色谱法概述 第二节 气相色谱仪 第三节 色谱理论基础 第四节 气相色谱操作条件选择 第五节 色谱定性、定量方法 第六节 毛细管色谱 第七节 液相色谱法 第八节 离子色谱法 第九节 高效毛细管电泳 第十节 薄层色谱与纸色谱法 结束 * *