比色法与荧光法对样品中三聚氰胺的检测.docVIP

比色法与荧光法对样品中三聚氰胺的检测 　　摘 要：作为一种应用较为广泛的化工原料，三聚氰胺中氮原子质量分数在66%左右，并具有较低的成本。近几年来，部分不法商家在奶制品内添加三聚氰胺，以此增加氮含量，冒充蛋白质。但三聚氰胺对人体健康将造成极大危害，如肾脏、泌尿系统疾病等，因此对饮用水与食品内三聚氰胺的检测已经成为质量技术监督部门的重要工作。本文主要对三聚氰胺的概况、比色法与荧光法对样品中三聚氰胺的检测进行了分析与探究，为食品安全事业的发展提供了强有力的支撑。 　　关键词：比色法；荧光法；样品；三聚氰胺；检测方式；概况；食品安全 　　现阶段我国主要选用HPLC、GC-MS、LC-MS、CE-MS等方式对食品内三聚氰胺含量进行检测。这些传统在检测过程中，必须进行繁杂的预处理，并需要购买昂贵的检查仪器等，进而延长检测时间与增加费用。随着政府对食品安全监督管理能力的不断提升，传统检测方式以无法适应社会发展需求，必须选用新型检测技术，如比色法、荧光法等，这些技术的应用可以有效提升检测三聚氰胺的准确性，为食品安全提供了可靠的保障。 　　一、三聚氰胺的概况 　　作为一种化学原料，三聚氰胺在木材、塑料、涂料、电气等领域得到了广泛地应用。也可以叫做密胺、蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。白色单斜晶体为三聚氰胺外观，没有味道。在甲醇、甲醛、乙酸等物质内可溶解，在苯、丙酮、醚类及四氯化碳中不溶解。在受热情况下，分解后将有剧毒氰化物气体释放出来。 　　三聚氰胺自身具有较低的毒性，成年人体内三聚氰胺可大部分排除，如和三聚氰酸相结合，将有氰尿酸三聚氰胺出现在人体内，这种物质无法在人体内溶解，长期摄入三聚氰胺，对人体将造成极大的损害，导致膀胱结石、肾结石等疾病的出现。 　　二、比色法对样品内三聚氰胺的检测 　　1、比色法分析 　　作为检测三聚氰胺的一种新型方式，其检测方式较为简便、快捷，灵敏度较高。比色法利用测量与分析有色物质溶液颜色的深浅，对待测物质含量进行确定。上个世纪30到60年代之间是比色法发展的繁荣时期，主要在冶金、地质、金属材料内微量金属等方面选用比色法进行测定。随着光学仪器制造技术的发展，紫外―可见分光光度计具有较高精密度、成本较低，在日常生活中得以普及。近年来在生物细胞与化学分析中比色法得到了广泛地应用，如无机焦磷酸酶、胫基自由基等。纳米金是指金颗粒（直径为1到100毫米），其由一定数量的金原子构成8面体结构。溶于水的胶体状粒子为纳米金，主要由四氯金酸还原法合成。作为纳米材料研究中最为广泛的材料，纳米金的光学性质与化学稳定性较强。 　　2、比色法对样品内三聚氰胺的检测 　　（1）检测方式 　　在三聚氰胺比色法检测中，主要分为2种形式：修饰过的纳米金与没有修饰过的纳米金，其区别为纳米金表面是否修饰过。通过范德华力没有修饰的纳米金和三聚氰胺分子内的胺基具有相互吸引的作用。各个三聚氰胺分子胺基含量为3个，通过该吸引力可缩短纳米金颗粒之间的距离，产生聚沉情况。这种没有修饰的三聚氰胺的检测方式，具有较为简便的操作程序、检测时间短，但具有较高的检测限及较差的选择性。如选用部分有机小分子修饰纳米金，如核黄素等，可对三聚氰胺检测效果进行有效提升，并等增加选择性。但修饰时间需要一到三天，同时需要严格控制其修饰条件。但现有方式对比色法在三聚氰胺检测中还存在相应的局限性。 　　（2）检测流程 　　在三聚氰胺检测过程中，通过柠檬酸钠还原法制作的纳米金溶液进行检测。第一，在1.5毫升离心管内将纳米金溶液（0.9毫升）和磷酸盐缓冲溶液（16.5uL）进行有效混合，随后将6uL的Tn均匀混合。第二，将不同浓度三聚氰胺加入到离心管内，确保混合的均匀性。第三，在以上混合液内加以浓度为10%的氰化钠（12uL），均匀混合后，通过眼睛就可以对其颜色变化进行观测，定量检测科可选用紫外―可见分光光度计。 　　基于纳米金良好的比色性质，在三聚氰胺检测中应用比色法，可在单链DNA存在条件下，可定量检测比色法对纯水与实际样品内三聚氰胺的含量。在条件优化条件下，该方式对三聚氰胺的检测限为0.011umol/L，可在5分钟内有效控制其过程中。在检测三聚氰胺中比色法的选择性较高。 　　三、荧光法对样品内三聚氰胺的检测 　　荧光法是指紫外光照射某些物质后出现的能够反映该物质特性的荧光，可进行定性与定量分析的方式，是三聚氰胺检测的一种新技术。Monardes在1575年首次利用植物俞创木切片黄色水溶液取得。因荧光法具有较高灵敏度、良好选择性及样品用量少等特点，在生命科学、医学及有机化学等方面得到了广泛地应用。 　　作为分子发光的重要组成部分，荧光是利用测量被激发的分子回到基态时所发射的光辐射来进行分析。分子激发与失活是荧光产生、发展的主要历程。X射