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半衰期测定
二、实 验 原 理 1.多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后,如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标,时间为横坐标,其时量关系常呈直线。 2.药物血浆半衰期(half life,T1/2)为: 二、实 验 原 理 3.呈色原理: 磺胺类药物在酸性溶液中,与亚硝酸钠起重氮反应,生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类 化合物起偶联反应,生成橙红色的偶氮化合物。 偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。 三、实 验 动 物 家兔(体重2.5Kg左右) 四、实 验 器 材 和 药 品 1. 器材:分光光度计、离心机、兔手术台、手术器 械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、 移液管、离心管、试管等 分光光度计 离心机 四、实 验 器 材 和 药 品 2.药品:20%磺胺嘧啶钠溶液、1%肝素钠溶液、 0.02%磺胺嘧啶钠溶液、7.5%三氯醋酸溶液、 0.5%亚硝酸钠溶液、0.5%麝香草酚溶液、 20%NaOH溶液、20%乌拉坦溶液、蒸馏水 五、实 验 步 骤 (一)动物基本操作 (二)测定液和标准液的配制 (三)比色管的配制 (四)比色与计算 (一)动物基本操作(血液标本的采集) 1.麻醉:抓取家兔1只,称重,用20%乌拉坦溶液5mL/kg行耳缘静脉麻醉,然后固定于手术台上。 (一)动物基本操作(血液标本的采集) 2.游离颈总动脉:手术区剪毛,沿正中线剪开颈部皮肤,钝性分离皮下组织及肌肉,找出一侧颈总动脉并分离约2~3cm左右,在其下穿线两根线备用。 (一)动物基本操作 3.全身肝素化:耳缘静脉注射肝素2ml。 4.动脉插管:远心端结扎,近心端用动脉夹夹闭,在两线中间的动脉上剪一“V”形切口,插入肝素浸润过的动脉插管,用线结扎并做二次固定以备取血用。 (一)动物基本操作 5.取血:打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用;然后由耳缘静脉注射20%磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg,于给药后10min及40min各取血2ml,分别置于同上试管中待用 (二)测定液和标准液的配制 测定液的配制:抽取上述血液各0.2ml,置于盛有7.5%三氯醋酸溶液5.8ml的玻璃试管中充分摇匀,然后以1500r/min,离心5min待用。 标准液的配制:取0.02%磺胺嘧啶钠溶液0.2ml,加入7.5%三氯醋酸溶液5.8ml中,摇匀待用。 (四)比色与计算 用722型分光光度计进行比色,选波长520nm,以空白管调“0”点,读出标准管及各测定管光密度,并记录。 六、实 验 结 果 六、实 验 结 果 2.计算Ke 及T1/2 七、注 意 事 项 1.麻醉时一定把握好速度。 2.每次取血之前要先将残血放掉。 3.各盛血的试管及动脉插管要用肝素浸润,动脉插管前要先注射肝素(全身肝素化)。 4.将血样加到三氯醋酸试管中应边加边摇匀,否则易出现血凝块。 5.配制比色管的时候各个试管要做好标记。 6.加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱。 * * 磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定 磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定 新乡医学院三全学院 药学院 药理教研室 贾杰 一、实 验 目 的 1.掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法 2.掌握药物半衰期的计算方法 3.了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意 义 Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1 给药40min 给药10min 给药前 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 0.5%麝香草酚 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5%NaNO2 / / / / 1.5 蒸馏水 / / / 1.5 / 标准液 1.5 1.5 1.5 / / 测定液 测定管(mL) 标准管 (mL) 空白管(mL) 成分 (三)各比色管的配制 0.146 光密度值 给药后40min 给药后10min 给药前 测定管 标准管 1.各比色管的光密度值 Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1 CNaSD=C标/OD标×(OD给药后-OD给药前) *
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