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挥发油实验报告 - 实验报告 - 书业网 篇一：实验报告 关于“菊花挥发油GC指纹图谱分析”实验报告 实验组成员：杨蕊、周钰、曹璐、陈琳、张明宇、顾炳琛 指导教师：江明珠 引言： 菊花是一种常用中药, 为菊科植物。药用菊花在我国栽培历史悠久，形成多个地道产区，产生不同的药材品种—“亳菊”、“滁菊”、“杭菊”与“贡菊”，分别产自安徽省亳州市、滁州市、黄山市及浙江省桐乡市。市场上流通的主流品种还有河南武陟的“怀菊”，四川中江的“川菊”，河北安国的“祁菊”，山东嘉祥的“济菊”，浙江德清的“德菊”。其具有散风清热、平肝明目之功效，用于治疗风热感冒、头痛眩晕、目赤肿痛、眼目昏花。 挥发油是菊花抗菌作用的物质基础，其中的樟脑、龙脑则是其发挥抗菌作用的主要成分，具有抑菌、抗肿瘤、平喘、抗炎等作用。菊花挥发油的化学成分包括脂肪族、单萜、倍半萜及含氧衍生物。单萜、倍半萜的含氧衍生物多具有较强的生物活性和香气，是医药、化妆品和食品工业的重要原料。因产地及加工炮制方法的不同，挥发油的成分不同，导致其药效不同。 众多的菊花品种，均作为中药菊花在市场流通，而各品种在药材质量、化学成分和应用上又不相同，各有侧重点。因此，需要明确这些品种菊花成分差异。对于道地药材质量控制和鉴别，为中医临床提供优质道地药材，提高临床疗效具有重要意义。 一 实验名称：菊花挥发油GC指纹图谱分析 二 实验目的： 1 菊花挥发油提取 2 菊花挥发油气相色谱指纹图谱的建立； 3 菊花挥发油气相色谱指纹图谱分析及信息挖掘。 三 实验原理： 先用蒸馏装置蒸馏菊花粉末，提取蒸馏所得的挥发油。再用气相色谱仪测定。通过对菊花挥发油GC指纹图谱分析来确定菊花挥发油所含成分以及其含量。 四 实验材料： 菊花，采自全国各地，共126个样本。三氯甲烷（氯仿），无水硫酸钠。 五 实验仪器： 整套蒸馏提取装置，Agilent气色谱分析仪，DB－1－二甲基聚硅氧烷色谱 柱，5μL进样器，电子天平 ，DF-15粉碎机。 六 实验步骤： 1、粉碎：将菊花干燥花序样品置于粉碎机中，室温粉碎，过80目筛。 2、提取： 1）用分析天平称取粉碎后的菊花粉末10克，将其通过纸漏斗倒入1000ml圆底烧瓶中，加入500毫升蒸馏水固定在铁架台上，并与索氏萃取器连接，固定。索氏萃取器的冷凝管下口与自来水管连接用来通入冷凝水，上口连接橡皮管用来排水。接通冷水，检验装置是否连接好。然后开始加热。 2）用电炉加热至圆底烧瓶中悬浊液沸腾，此时开始计时，一小时后关闭电源。冷却10分钟左右，取索氏提取器中的冷凝液上层有油状的液体约2ml至于一离心管中。然后加入约等量三氯甲烷轻轻且充分振荡混匀，静置至分层。用胶头滴管吸取下层液体将其移入另一离心管中，然后加入适量无水硫酸钠。之后密封粘贴标签，置于温度较低处（如冰箱中）冷藏，待用。 3、测定：通过多级升温的方法，测定菊花挥发油的分离情况。 1）色谱柱：DB-1－二甲基聚硅氧烷，毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25μm)； 2）检测器：氢焰离子化检测器(FID )； 3）检测器温度：230；空气流量：300 mL/min； 4） 氢气流量：30mL/min； 5）载气：氮气； 6）载气流量：213mL /min； 7）分流比：50：1； 8）程序升温：从50开始加样，依次以4/min升至80，1.5/min升至120，4/min升至145停留10min，3/min升至175，25/min升至230停留10min;进样量为1μL。 4、数据采集：经过气相色谱处理的样品数据，并不适宜直接进行指纹图谱分析。因为各方面的因素，包括挥发油的挥发性、样品中挥发油的含量、气相色谱进样口是否漏气等，都会导致进入色谱柱中的挥发油含量的降低，从而导致收集的数据偏小。一些低含量物质的色谱峰，会因为斜率灵敏度过高而不被识别。通过调节气相色谱重新处理选项中的斜率灵敏度，可以来优化样品色谱数据使色 谱峰最大化显示。用编辑选项下的输出功能，将样品数据导出，并以CDF格式的信号文件保存。该格式可以被中药色谱指纹图谱相似度评价系统识别，进而可以用来进行GC指纹图谱的建立和菊花挥发油相似度的评价。将导出的数据按照附录中的品种信息进行分组，便于后面的分析。 七 实验结果： 下面为怀菊G C指纹图谱，其中共有4个样品，样品信息如下：S1为93号样品；S2为84号样品；S3为80号样品；S4为82号样品。 怀菊GC指纹图谱 序号 80 82 84 93 15 15 15 15 品名 怀菊 怀菊 怀菊 怀菊 加工方法 烘干 阴干 烘干 阴干 产地 河南赵庄村2号 河南1号样品 河北引种河南怀菊 河北引种河南怀菊 备注09.10. 1