选修一专题五DNA的粗提取与鉴定.docVIP

［专题五］　　DNA和蛋白质技术 课题1、DNA的粗提取与鉴定 使用说明 1、预习课，依据导学案学习目标及重、难点自学课本内容，独立完成“自主学习”部分，用红笔标注重点、疑点。（可查阅相关资料）2、课堂上通过小组合作、互动、展示、点评加深对本节知识的理解达成目标3、五分钟完成测评题目 一、明确学习目标、把握重难点 知识目标 DNA粗提取的方法 DNA的鉴定方法 能力目标 提升学生动手能力，培养学生实验兴趣 情感目标 通过实验操作培养学生对待科学实事求是严谨的态度。 重、难点 DNA粗提取和鉴定的方法 二、自主学习、筑牢基础 预习要求：A、结合学习目标及重难点，预习课本内容，划出你认为重要的、不理解的、有疑问的。（15min）B、做学案基础知识部分，。（5-7min）C、组长组织，组员进行对学，对学不能解决的问题，进一步进行群学。（3-5min）D、做探究题目和基础试题训练。（会做的做完，不会做的做标记或留白） 一、实验原理： 1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法：提取生物大分子的基本思路是选用一定的： 或 分离具有不同物理或化学性质的生物大分子物质。 方案一： 方案二： 方案三： 2、DNA鉴定原理：在 条件下，DNA遇 会被染成 ，因此 二、实验设计： （一）实验材料的选取。选取原则： 讨论：本实验以鸡血为例做实验材料的原因 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液。 1 获取新选的 ，并向其注入一定的 ，然后将新鲜的鸡血离心或静置24h，从而获得富含DNA的 。 2 在鸡血细胞中加入一定量的 ，同时用玻璃棒搅拌， 后收集 即可。 讨论：此步骤滤去的是什么物质？获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 注意事项：鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。 （三）去除滤液中的杂质 方案一：在滤液中加入 溶液，过滤除去 ，再向滤液中缓缓加入 并用玻璃棒搅拌，随着 浓度的降低溶液中会 ，当Nacl浓度达到0.14mol/L时析出的丝状物最多。用多层滤纸过滤除去 ，将过滤后的带有DNA的滤纸重新放入 溶液中，使DNA溶解到溶液中，过滤取其滤液。 讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质 答： 方案二： 思考：观察图5-2，洗涤剂在提取DNA中有何作用？ 答： 方案三： 讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？ 答： （四） DNA的析出与鉴定 1 、DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液 的 （体积分数为95％），静置2-3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。用玻璃棒 搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水 2 、 DNA的鉴定: 鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为 于两只试管中，其中一只加入DNA丝状物，各加入 试剂。混合均匀后，将试管置于 加热5min,待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否有 讨论：比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？这一鉴定结果说明什么问题？ 答： DNA的直径约为20×10-10 m，实验中出现的丝状物的粗细能否表示1个DNA分子直径的大小？ 答： 三、自主检测，体验成功【经典例题剖析】 例1 在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是（ ） A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂，降低NaCl浓度使DNA析出 C. 使血细胞破裂，增大DNA溶解度 D. 使血细胞破裂，提取含杂质较少的DNA 解析：在该实验过程中，第一次加入蒸馏水的目的是使血细胞过度吸水而破裂，以便核物质溶解。第二次加入蒸馏水是为了降低NaCl浓度至0.14mol/l，因为此时的DNA溶解度最小，可使DNA析出。 例2．向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是　　A．加快溶解DNA的速度　　B．加快溶解杂质的速度　　C．减少DNA的溶解度，加快DNA析出　　D．减少杂质的溶解度，加快杂质的析出解析：当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低。在溶解细胞核内的DNA时，用的是2 mol/L的NaCl溶液，这时DNA在溶液中呈溶解状态，为了使溶解在该溶液中的DNA析出，需要降低DNA的溶解度，因此需不断加入蒸馏水。　　答案：C 第一步 第二次：使DNA黏稠物析出 第三步 3、三次过滤 发生步骤 第一次： DNA存在于滤液里 第一步 第二次： DNA被留在纱布上 第四步 第三次： DNA存在于滤液里 第六步 五、课堂练习。南阳教研本节习题 【知识拓展】 1.二苯胺鉴定DNA的化学原理 DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用