第十章细菌和病毒的遗传探索.pptVIP

实验 选择的标记基因 未选择的标记基因频率 1 leu+ 50%azir 2%thr+ 2 thr+ 3%leu+ 0%azir 3 leu+ thr+ 0%azir 1 2 3 3个位点之间的连锁关系：　　实验1： 2种可能排列：　　　　　　azi　leu　　　　　　thr 　　　　　　　　 leu　azi　　　 thr　　实验2：肯定3个基因的顺序是：　　　　　　azi　leu　　　　　　thr　　实验3：　　　证明这一顺序，因为leu+和thr+片段之间 从未携带有azir。　　 ㈡、特殊性转导：指一些温和噬菌体只能转导细菌染色体基因组的某些基因。. 特点：转导仅限于靠近原噬菌体附着点的基因。 3660 亲 二、接合 (P215) 是指原核生物的遗传物质从供体转移到受体内、并通过交换而发生重组的过程。 (一) E. coli的杂交试验(黎德伯格和塔特姆,1946) 1、材料（ E. coli ）： A株:met- bio- thr+ leu+ ； B株: met+ bio+ thr- leu- 。 2、方法： 将A、B混和，在基本培养基(固体)上涂布培养。 3、结果： 平板上长出原养型菌落(met+ bio+ thr+ leu+)。 单基因回复突变的频率约为10-6； 双基因回复突变的频率则为10-12，频率很低。 但试验中产生原养型菌落产生的频率非常高，因此基本可以排除回复突变的可能。 （1）回复突变 4、几种可能解释及其分析 （2）转化作用 Lederbery和Tatum曾把品系A的培养液经加热灭菌，加入到B品系的培养物中，未得到原养型菌落；表明原养型菌落可能不是由转化作用产生。 戴维斯(Dawis, 1950)的U型管试验(结果没有得到原养型细菌)； 实验结论：细胞直接接触是原养型细菌产生的必要条件。 （3）经过上述分析可以认为： 在Lederbery和Tatum及其它类似试验中，发生了一种不同于转化的遗传重组方式，称之为接合。 （4）Hayes(1952)研究表明： 大肠杆菌两种不同菌株(品系)接合过程中遗传物质的转移是单向的； 从而认为大肠杆菌存在两种类型品系：雌性与雄性分别作为接合过程中遗传物质的供体与受体。 (二) 接合的遗传机制 1. F因子： Hayes等发现，大肠杆菌在接合中作供体的能力受细胞内一种致育因子(F因子)控制。 F因子的化学本质是DNA，可以自主状态存在于细胞质中或整合到细菌的染色体上。 F因子可以在细菌细胞间进行转移并传递遗传物质。 F因子的存在状态 2. F+ 向F-的转移（ F+ × F-） 5’ ↓ F+ → F+ F- → F+ 3. Hfr × F- 受体细胞常常只接受部分的供体染色体，这些染色体称为供体外基因子，而受体的完整染色体则称为 受体内基因 子，这样的 细菌称为部 分二倍体或 部分合子、 半合子 ㈢、中断杂交试验及染色体连锁图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的，Jacob和Wollman在五十年代设计了一个著名的中断杂交试验。 ? Hfr:thr+leu+lac+gal+azistonsstrs F- : thr-leu-lac-gal-aziRtonRstrR ? 每隔一定时间取样，放在食物搅拌器内搅拌 ? 培养在含str的完全培养基上， Hfr被杀死 ? 用影印培养法测试形成的F-菌落的基因型， 确定每个基因转入F-的顺序（时间） ? 根据基因转入F-的时间，进行细菌染色体作图 ? ? ? ? ? ? 　 ①．8分钟：thr+进入F-细胞； 8.5分钟：leu+进入F-细胞； ②．9分钟：出现叠氮化物抗性的菌落，azir 基因进入F- ③．11分钟：出现抗噬菌体T1的F-； ④．18和25分钟：分别出现乳糖