第9章吸光光度法(13-11-17)概念.ppt

* 525nm出有最大吸收——最大吸收波长 一般选最大吸收波长为工作波长 * * * * T = 0.0 % A = ∞ T = 100.0 % A = 0.0 T = 36.8 % A = 0.434 * 1. 数字显示器 2.A调零旋钮 3.选择开关 4. A调斜率电位器 5.浓度旋钮 6.光源室 7. 电源开关 8.波长手轮 9.波长刻度窗 10.样架拉手 11.调100%T旋钮 12.调0%T旋钮 13.灵敏度调节旋钮 14.干燥器 * §9·3 光度测量仪器与测量方法 一、测量仪器 1.仪器的主要部件 （光路） ——光源 ? 单色器 ? 吸收池 ? 检测·读数系统 ?? 提供光束 ?? 提供色光 ?? 盛放试液 ?? 光?电? A和T读数 ⑴光源：获取充足、均匀、稳定光强 ⑵ 单色器：将复合光分解为单色光 棱镜：玻璃（350-3200nm)石英（185-4000nm) 光栅：利用光的衍射与干涉制成 光路 返回 ⑶吸收池——又称比色皿 ⑷检测读数系统 原理：利用光电效应，使透过溶液光照射到检测器上产生光电流，经过转换系统后由指示器指示出T或A 检测器：光电池、光电管 指示器： 2.常用仪器 a). 721型分光光度计(360～800nm) b). 722型光栅分光光度计(330～800nm) c). 751型紫外-可见分光光度计 721型分光光度计 返回 722型光栅分光光度计 数字显示器 选择开关 A调零旋钮 A调斜率电位器 浓度旋钮 电源开关 波长手轮 波长刻度窗 灵敏度调节旋钮 调0%T旋钮 调100%T 旋钮 样架拉手 返回 测量方法 ——目视比色法(简介) 和分光光度法： 1. 比较法 ～同条件下配制标液、试液显色液并测量其A值： AS=-lgTS= ?bCS AX= -lgTX= ?bCX 比较求得CX 2. 工作曲线法 同条件下配制试液、系列标液显色液并测量其A值： 1).作出(AS～CS)标准曲线 ； 2).从图中查出AX对应的CX值(C0 = CX ×稀释倍数). 标准曲线法测定铁含量 CFe(mg/L) A 0.00 0.000 2.01 0.097 4.01 0.200 6.02 0.304 8.02 0.408 10.0 0.510 12.0 0.613 14.0 0.718 x 0.413 C(mg/L) 0 2 4 6 8 10 12 14 A 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 标准曲线 Ax Cx A= 0.0515C-0.0043 x = 8.10 (mg/L) 返回 3. 标准加入法 ～同条件下配制(系列)标液及加有标液的试液显色液, 测量其A值，比较之： AX = ?bCX AX+S = ?bCX+S = AX + AS 4. 示差法 ～以浓度稍低于试液的“标准”溶液(显色液)作参比液, 来测量试液的吸光度(标准加入法或 标准曲线法): AS = ?bCS (参比液调AS = 0) AX = ?bCX △A=AX－AS = ?b(CX – CS)= ?b△C CX = CS + △C 光路 返回 §9·4 光度法误差与测量条件的选择 一、光度分析误差的来源 1. 仪器误差 对给定光度计，仪器误差一定。 2. 操作与读数误差 正常时，读数误差?T约?(0.5～1)% 3. 偏离光吸收定律引起的误差 实际测定中A～C关系曲线在C较大时偏离线性 关系的现象称偏离光吸收定律. 3.偏离朗伯—比耳定律引起的误差 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。