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PAGE  PAGE 11 生化工程（生物化学技术原理与应用） 题库 一、名词解释 Ks盐析：Cohn经验公式表明，当β（蛋白种类，温度，pH）与Ks（盐种类）一定时，蛋白质溶解度的对数和该溶液的盐浓度呈反比关系。离子强度越大，蛋白质溶解度越小，直至沉淀。这种盐析方法即为Ks盐析。 双水相层析：双水相萃取技术：利用溶质在两个互不相溶的水相之间的分配系数不同而进行分离的萃取技术。 反萃取：为了进一步分离干扰物质， 或者被测组分萃入有机相后不便于后继的测定， 常须进行反萃取。——将欲测组分从萃取相重新转入水相（原溶剂）。 凝聚：指在某些电解质的作用下，胶体脱稳并使粒子相互聚集成１mm 大小块状凝聚体的过程。（凝聚是在高价无机盐作用下，由于经典排斥力的降低，而使胶体体系不稳定的现象。） 蛋白质盐析：当盐浓度达到一定范围时，蛋白质溶解度随盐浓度的增加而降低并从溶液中析出，该技术称为蛋白质盐析。 膜分离技术：在分子水平上，不同粒径的混合物在通过分离膜时实现选择性分离的技术。其实质是物质透过或被截留于膜的过程，即依据膜孔径的大小而达到物质分离的目的。 双向电泳：第一向为定点聚焦电泳，使蛋白质在横向分离至各自等电点，第二向为SDS，使蛋白在纵向按照分子大小进行分离。 超临界流体：在超临界状态下，纯物质所呈现的流体状态，其体系性质均一，气液界面消失，既不是气体，也不是液体，称为超临界流体。 排阻极限：不能进入到凝胶网络内部的最小分子的相对分子量。 （渗入极限：能够完全进入到凝胶网络内部的最大分子的相对分子量。） 阴离子交换剂：功能基团带正电荷，与阴离子交换。 （书：阳离子交换剂的电荷基团带负电，反离子带正电。因此这种交换剂可以与溶液中的正电荷化合物或阳离子进行交换反应。 阴离子交换剂是在树脂中分别引入季胺［—N（CH3）3］、叔胺［—N（CH3）2］、仲胺［—NHCH3］和伯胺［—NH2］）基团后构成的。 阴离子交换树脂对化学试剂及热都不如阳离子交换树脂稳定。） 交换容量：是指离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。通常以每毫克或每毫升交换剂含有可解离基团的毫克当量数（meq/mg或meq/ml）表示。（书：是指离子交换剂与溶液中离子或离子化合物进行交换的能力。一般用总交换容量和有效交换容量表示。） 层析技术：主体介质由互不相溶的流动相和固定相组成，利用混合物中各组分物理化学性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等），使各组分在两相中的分布程度不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。 （层析是以基质为固定相（呈柱状或薄层状），以液体或气体为流动相，使有效成分和杂质在这两个相中连续不断、反复多次地进行分配或交换、吸附作用，最终达到分离混合物之目的。） 矫正保留时间：（书P416） 【死时间（tr0）：不与固定相作用的物质从进样到出现峰极大值时的时间，它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据t0可求出流动相平均流速。（书：死时间是指不被固定相吸附或溶解的空气或甲烷，从进样口经过柱体出现浓度极大值所需的时间，即空气通过色谱柱所需要的时间。） 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。（指样品从柱口经过色谱柱出现浓度极大值时所需的时间，包括死时间与样品在两相中分配时间的总和。） 调整保留时间tr’：某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组份在固定相中的滞留时间。即tr’= tr －tr 0。 由于保留时间为色谱定性依据。但同一组份的保留时间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。 （书：校正保留时间（tr’）：是指保留时间扣除死时间，即样品组分在液相中保留的总时间。写成公式为：tr’= tr －tr 0。）】 键合型固定相：（书：P147）将有机物质中的某些基团通过化学方法，以共价键方式制成成固定相。（用键合型固定相构成的色谱称为键合色谱。） 二、填空题 1.常见的破碎技术有机械破碎， 物理破碎 ， 化学破碎 以及 酶解破碎（生物酶解） 。 2.常用的预处理技术有加热、调节pH值、 凝聚和凝絮 、 加辅助过滤剂（惰性助滤剂） 以及 加入反应剂 。 3.离心力的常用表示方法两种，在低速条件下常用 转速 表示离心力，单位为 r/min（rpm） ；也可用 相对离心力（RCF） 表示离心力，单位为 g（重力加速度） 。 4.常见的双水相系统有两大类型，一类为 高聚物/高聚物（PEG/DEX） ，另一类为 高聚物/盐（PEG/无机盐） 。 5.超临界流体萃取的分离原理有三种， 等温变压 ， 等压变温 以及物理吸附法。（等温等压吸附法） 6.离子交换剂